- 吴卫星,张维,马贤凯
将编码人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)核心蛋白(Gag)P24的大部分基因片段,插入大肠杆菌表达载体pEX31A中,获得的表达产物MS2-Gag融合蛋白占菌体总蛋白的20%左右。Western blot结果证明,这种表达产物能被艾滋病(AIDS)患者血清中的特异性抗体所识别。这是国内首次报道在大肠杆菌中高效表达人类免疫缺陷病毒Ⅰ型核心蛋白。对表达的重组核心蛋白的意义及应用前景进行了讨论。
1991年03期 197-202页 [查看摘要][在线阅读][下载 590k] [下载次数:56 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:450 ] - 邵一鸣
<正> 日本鹿儿岛大学医学院病毒学教授园田俊郎于1991年4月5日在病毒学研究所介绍了他们在Ⅰ型嗜人T细胞病毒(HTLV-1)方面的研究进展.
1991年03期 202-294页 [查看摘要][在线阅读][下载 76k] [下载次数:23 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:328 ] - 任贵方,梅雅芳,王申,陈红,王文,朱既明,李宝林,庞凤珍,吴虹,宋清林,雷祖才
本文报告用转基因细胞B43分泌的乙型肝炎病毒表面抗原主蛋白经纯化制成的87-4批重组疫苗进行临床接种观察的结果,同时用8723-1批血源疫苗作对照。疫苗接种采用0、1、2月各接种1针的方案。重组疫苗共接种111名8~13岁儿童,分为20μg、10μg及5μg 3组,血源疫苗分为20μg、10μg 2组。所有儿童接种前检查乙型肝炎病毒表面抗原、抗体及核心抗体均阴性.20μg组1针后1个月,重组疫苗阳转率60.5%,血源疫苗为31%;2针后1个月,两种疫苗的阳转率分别为100%和72.4%;血源疫苗3针后1个月阳转率也仅79.3%。3针后1个月两种疫苗的抗体几何平均滴度(GMT)分别为492.7和207.4mIU。但重组疫苗6个月后血清抗体的GMT为628mIU。10μg组1针后1个月的阳转率重组疫苗为21.7%,血源疫苗为20.9%;2针后1个月分别为87%及62.8%;3针后1个月分别为100%及81.4%。抗体GMT分别为163.7和129.6mIU.5μg组的重组疫苗免疫后6个月100%阳转,其GMT为56mIU。结论认为无论从阳转率或几何平均滴度分析判断,重组疫苗均优于血源疫苗。
1991年03期 203-209页 [查看摘要][在线阅读][下载 285k] [下载次数:24 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:435 ] - 陈士友,陈溥言,蔡宝祥,钱建飞
<正> 禽呼肠孤病毒(Avian Reovirus,ARV)属呼肠孤病毒科的禽群,广泛分布于鸡群中,能从健康鸡和许多发病鸡体内分离到。已知与ARV有关的疾病有病毒性关节炎、溃疡性肠炎、慢性呼吸道病、心肝病损、肉鸡矮小综合症、蓝翅病等。ARV的存在给养鸡业造成了严重的危害。本试验利用淋巴细胞杂交瘤技术在国内首次建立了8株分泌ARV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,并对ARV4个毒株的抗原性进行了比较。 选用ARV的FDO株,在鸡胚原代成纤维细胞上增殖,免疫用和检测用病毒分别经差速离心和密度梯度离心纯化。按常规方法对6~8周龄BALB/c小鼠进行长程和短程(脾内直接注射)免疫,免疫鼠脾脏细胞与Sp2/0细胞胞以5:1的比例进行融合,克隆化培养和筛选后,从两次融合的70个阳性孔中获得C61、C74、
1991年03期 209页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k] [下载次数:41 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:311 ] - 杨文刚,陈鸿珊
用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)阳性的安徽庐江鸭血清感染DHBV阴性的北京雏鸭,扩增病毒,将提取的DHBV-DNA插入pUC18质粒,转化E.coli JM 105。酶切重组质粒及South-ern转膜杂交结果证实,质粒pLJ76的插入片段为DHBV全基因组。用EcoR Ⅰ等11种限制性内切酶对pLJ76进行酶谱分析,并与美国,西德的已知DHBV基因组比较。定向克隆该株病毒不同基因编码区片段,构建正负单链探针,将斑点杂交和单链电泳检出的M13阳性重组子与已知序列的DHBV基因组作比较,提示获得了该株病毒基因组的S、Pre-S、P和X/C等蛋白编码区的正、负单链克隆株。
1991年03期 210-216页 [查看摘要][在线阅读][下载 665k] [下载次数:38 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:320 ] - 郭素华,周岚,孟清,张鹤龄
<正> 马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)在植物体内数量很少,难以提纯足够量病毒进行免疫,至今未见国内有制备PLRV单克隆抗体(McAb)的报道.本文以本室以前报道的方法提纯马铃薯卷叶病毒作为抗原,直接注入Balb/c小鼠脾脏,随后从尾静脉加强注射,采用杂交瘤技术建立了4个分泌抗PILRV McAb的杂交瘤细胞株。经微量免疫双扩散法鉴定,杂交瘤细胞株A1、A3、D3分泌的McAb均属gG1亚类,C3株者属IgG2a,它们的轻链都是λ型。将0.5ml含10~8个A1,A3,C3,D3杂交瘤细胞注入
1991年03期 216页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k] [下载次数:44 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:313 ] - 舒琍琍,冯慧敏,金奇,侯云德
本文从一例中国妇女外阴尖锐湿疣组织标本中提取DNA,用BamH Ⅰ酶切,以pAT153为载体,成功地克隆了一株我国人乳头瘤病毒6型基因组。经Southern杂交、酶谱及部分DNA序列分析,发现该克隆的HPV-6基因组有明显变异,可确定该株病毒为HPV-6的一个新变种,命名为HPV-6BV.
1991年03期 217-221页 [查看摘要][在线阅读][下载 499k] [下载次数:16 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:325 ] - 张卫,司静懿,李昆,陈连凤,赵维敏,韩日才
利用HZIP16和HZIP16K(见材料和方法)质粒,将人乳头瘤病毒16型(HPV-16)的全早期区基因及其开放读码框架(ORF)E6-E7分别转入ψ2细胞,所产生的重组病毒能诱导NIH3T3细胞发生转化。转化细胞具有恶性细胞的生物学和形态学特征,可在0.3%软琼脂中形成集落,可使裸鼠致瘤。Southern blot证明,HPV-16 E6-E7 ORFs序列以整合形式存在于转化细胞和裸鼠肿瘤细胞DNA中,表明HPV-16 DNA具有体外诱导NIH3T3细胞恶性转化的作用,E6-E7 ORFs是诱导细胞转化的关键基因。
1991年03期 222-226+295页 [查看摘要][在线阅读][下载 1308k] [下载次数:29 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:388 ] - 孔令雄,吴旻
将人转化生长因子β型(HTGF-β)基因克隆到逆转录病毒载体pDO R-Neo中,构建一株重组质粒(pDOT)。然后将pDOT转染到逆转录病毒的包装细胞(ψ2和pA317细胞),组装成为一个携带HTGF-β基因的重组病毒。对重组病毒的滴度,所携带的HTGF-β基因的表达,对感染的NIH 3T3细胞生长的抑制作用进行了初步研究。
1991年03期 227-230页 [查看摘要][在线阅读][下载 276k] [下载次数:14 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:313 ] - 柴建国,姚楚铮
出生24小时的乳地鼠,经腹腔(ip)、肌肉(im)及皮下(sc)接种流行性出血热(EHF)病毒A-16株,均可引起系统性感染,导致急性发病死亡。皮下接种组的存活时间比腹腔和肌肉注入者稍长。接种病毒时的鼠龄与死亡率相关,3日龄的乳地鼠感染后全部死亡,9日龄乳地鼠的病死率则为50%。甲免疫组化法检查病毒分布表明,全身各器官中均存在特异性病毒抗原,其中尤以脑、肺、肾的病毒抗原量最多。各器官的病理变化基本上与EHF病毒抗原的组织定位一致。
1991年03期 231-234+296页 [查看摘要][在线阅读][下载 680k] [下载次数:14 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:286 ] - 赵新泰,吴祥甫,李载平,殷震
从貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)感染细胞培养物提取病毒的中间复制形双链DNA分子(RF DNA),经绿豆核酸酶(Mung bean nuclease)酶解消除RF DNA两端封闭的发夹结构,将全长基因组克隆于质粒pUC18中。对克隆片段进行了酶切位点分析,并做了限制性内切酶图谱。将测定的核苷酸序列与猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)相应片段的序列进行了比较,同源序列可达99.2%。
1991年03期 235-240页 [查看摘要][在线阅读][下载 403k] [下载次数:52 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:371 ] - 宋万敏,郭玉璞
采集了我国8个主要养鸭地区分属5个属的15种鸭科水禽的血清共717份,分别用缺口平移标记的DNA探针和体外转录合成的RNA探针进行血清斑点杂交检测,发现嗜肝DNA病毒(Hepadnavirus)在所检测的鸭科水禽中广泛存在,并首次发现在我国绿头鸭(Anas pla-tyrhynchos)、鸳鸯(英文名:Mandarin Duck,学名:Aix galericulata)、番鸭(英文名:Muscovy,学名:Sarkidiornis melanotos)和鹅的血清中存在嗜肝DNA病毒。还比较了不同探针的敏感性,发现RNA探针比DNA探针敏感约100倍。
1991年03期 241-245页 [查看摘要][在线阅读][下载 728k] [下载次数:22 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:321 ] - 陆惠华,龚祖埙,曹天钦
刺槐花叶病毒(Robinia mosaic,virus,RMV)是一种球状正链RNA病毒。病毒基因组RNA(RMV-RNA)在体外兔网状红细胞溶胞翻译体系中,能高效翻译病毒蛋白质,除主要产物31kD蛋白外,还有25kD和22kD等分子量料低的蛋白质。这些蛋白均能被刺槐花叶病毒的抗血清专一沉淀。31kD蛋白与该病毒外壳蛋白的电泳迁移行为一致。在体外翻译体系中,以完整刺槐花叶病毒颗粒作模板,发现在10mM pH6.0磷酸缓冲液中者(简称RMV-pH6)翻译水平很低;而在10mM pH8.0磷酸缓冲液中时(简体RMV-pH8)翻译活性显著提高,翻译产物除31kD蛋白外,比RMV-RNA者还多了6条高分子量电泳带。用圆二色(CD)和荧光光谱研究完整粒体RMV-pH6和RMV-pH8时发现,两者的外壳蛋白亚单位和病毒精细结构的构象有较明显的差异。改变pH值引起的构象变化可能是RMV脱壳翻译的机制之一。
1991年03期 246-252页 [查看摘要][在线阅读][下载 546k] [下载次数:24 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:310 ] - 王珣章,谢伟东,龙綮新,苏德明,钟江,蒲蛰龙
用具有多聚A信号、不带翻译起始密码子ATG或含三种读码框ATG的寡聚核苷酸为聚合接头,构建了含多角体蛋白基因、并能利用人工合成启动序列和多角体蛋白XIV启动子表达外源基因的转移载体质粒pSXIVVI~+X_3系列。为便于重组毒株的筛选,还组建了含合成启动子和β-半乳糖苷酶基因的无包含体粉纹夜蛾核型多角体病毒株TnNPV-SVI~-G,并由此建立起以上述质粒为转移载体,形成多角体及能在X-gal半固体培养基中呈白斑,具有易于辨认遗传标志的TnNP V表达载体系统。
1991年03期 253-261页 [查看摘要][在线阅读][下载 712k] [下载次数:131 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:50 ] |[阅读次数:310 ] - 朱素娟,王家驯,戈宝榛,司稺东
从13个省市的39家工厂,采集73份土和水标样。从中分离到63份噬菌体,阳性率占86.3%。电镜观察20株噬菌体,形态均属Akermann分类的B1型,即有一直径略有差别的正六角形的头和较长的非收缩弯曲的尾部。所分离的噬菌体均能裂解谷氨酸生产菌T6-13。形成的噬菌斑有4种类型。根据噬菌体形态、噬菌斑类型、对抗性菌株的裂解能力,选择一批制备抗血清,借交叉中和试验将63株噬菌体分成12个血清型。检查12个血清型噬菌体对不同的抗噬菌体突变株的裂解谱,有4种类型菌株,其中4-210菌株为具有抗噬菌体谱广的特性。结合对不同抗性菌株裂解能力的差异,12个血清型噬菌体又可分成15种血清—裂解类群。取其中21株噬菌体DNA用BamHⅠ酶切,出现16种不同电泳谱型。
1991年03期 262-268页 [查看摘要][在线阅读][下载 894k] [下载次数:32 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:276 ] - 纪志武,方仲,曾毅
以重组EB病毒早期蛋白P83为抗原,用Western blot检测了135份鼻咽癌病人和100份正常人血清中IgA/P83抗体,阳性率分别为96%和0,以常规的间接免疫酶法检测这两种血清中IgA/EA抗体,阳性率分别为71%和0。IgA/P83抗体的几何平均滴度较IgA/EA高4倍以上。这表明,用Western blot查IgA/P83敏感、特异,可替代用间接免疫酶法查IgA/EA用于鼻咽癌的早期诊断。
1991年03期 269-271页 [查看摘要][在线阅读][下载 118k] [下载次数:18 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:310 ] - 乌勇,陆虹,张珍,杨卫文,谷淑燕,皮国华
用硫酸铵沉淀方法纯化的重组HBcAg(rHBcAg作为免疫原免疫小鼠,获得 5株高滴度和特异性的HBc单克隆抗体(rHBcMcAb),纯化并酶标后与rHBcAg组合后用于血清HBcAb检测的试剂盒。经实验证明,该单克隆抗体具有特异性强、敏感和重复性好的优点,经不同株间的单克隆组合应用效果较好,可以代替具有污染可能性的血清来源的抗体。同时也证明经过初步纯化的rHBcAg为较好的免疫原。
1991年03期 272-276页 [查看摘要][在线阅读][下载 178k] [下载次数:20 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:340 ] - 张天堑,廖延雄,刘尧服
<正> O型口蹄疫(FMD)乳鼠毒注射到蚯蚓(pheretima sp.)体内后,间隔一定时间取蚯蚓制备组织匀浆浓,接种于BHK_(21)细胞管,盲传4代,再用O型FMDV反向间接血凝检测细胞培养液中带毒情况。注射病毒后的第8天仍可在蚯蚓体内检测到FMDV,但第14天以后则未查出。用此病毒洒在蚯蚓生活的土壤中,检测蚯蚓体内FMDV的结果亦同。本实验还间接地表明,O型FMDV不能在蚯蚓体内复制、增殖,
1991年03期 276页 [查看摘要][在线阅读][下载 32k] [下载次数:24 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:356 ] - 王哲,曾毅
从感染人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)后存活并增殖的MT-4细胞中筛选出一株带有HIV-1抗原但不释放感染性HIV的细胞株(MT-4A)。对MT-4A细胞进行抗原性分析表明有p24、gp41、gp120表达。将MT-4A细胞制备抗原片于HIV-1抗体检测,经大批量血清初筛试验获得满意结果。
1991年03期 277-281页 [查看摘要][在线阅读][下载 174k] [下载次数:42 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:299 ] - 张礼璧,刘玉清,刘文军
首次建立了用于脊髓灰质炎快速、分型诊断的血清IgM抗体捕捉法ELISA。检测了52例疑似病人,IgM阳性率为76.9%(40/52),而粪便病毒分离率仅为44.2%(23/52),前者的阳性检出率明显高于后者。做病毒分型诊断结果,与分离病毒中和试验定型的总符合率为92.86%(39/42)。检测601例来自全国各省的脊灰疑似病人血清,其阳性率波动于13%~92.3%,平均为61.1%。阳性率与收集血清的病日相关,发病0~3天收集者,阳性检出率为69.5%,4~25天者为64%,26~54天者为52%,55天以上者则未能检出。本检测方法需时1.5天,简便、敏感、特异,重复性良好,适用于脊灰的早期快速诊断。对其实用性进行了讨论。
1991年03期 282-287页 [查看摘要][在线阅读][下载 219k] [下载次数:36 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:343 ] - 杨毅力,赵小侠
<正> 由于重组DNA技术的建立,促使各种真核病毒用作载体成为可能。逆转录病毒是最早被发展为载体的真核病毒之一。已经发展起来的病毒载体还有SV40、牛乳头瘤病毒、腺病毒及痘苗病毒等载体。到目前为止,还没有一种病毒载体能够代替所有其它的病毒载体,但根据不同的目的可采用不同的载体。逆转录病毒在其生命周期中的一环形成前病毒(Provirus)DNA整合到宿主细胞基因组中,而其它病毒都没有能使其DNA高效地整合于宿主细胞染色体中的机制。逆转录病毒的这一特点确定了它在分子生物学中的特殊地位。逆转录病毒用作基因转移载体是在八十年代初发展起来的。1981年Temin、Wei
1991年03期 288-294页 [查看摘要][在线阅读][下载 336k] [下载次数:241 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:1439 ] 下载本期数据