- 任彩萍,蓝轲,冯湘玲,许亮国,何志巍,刘卫东,王慧,姚开泰
EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同。通过对小鼠CR2受体进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系 (TMNE)进行表达 ,观察转染阳性细胞是否具有结合EB病毒的能力。EBER - 1杂交结果显示 ,只有转染hCR2和突变型MCR2(mtMCR2 )的TMNE细胞可以感染EB病毒 ,但是前者感染EB病毒的阳性率比后者的高得多。电镜结果也进一步证实EB病毒可以感染这两种细胞。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。
2001年01期 1-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 112k] [下载次数:113 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:326 ] - 周玲,姚庆云,Steve.Lee,A.Rickinson,曾毅
为探讨痘苗病毒表达的Epslein Barr病毒 (EBV)核抗原 1、4(EBNA1、4)和潜伏膜蛋白 1、2 (LMP1、2 ) ,在不同人群的特异性T细胞引起的特异性T细胞杀伤 (CTL)中的作用 ,采集EBV阴性正常人、未经治疗的鼻咽癌 (NPC)病人和EBV IgA/VCA阳性者各 10人的周围血淋巴单核细胞 (PBMC) ,用EBV转化B淋巴细胞 ,建立类淋巴母细胞 (LCL)。用LCL刺激自体的T淋巴细胞作为效应细胞 ,以LCL感染重组痘苗病毒表达的EBNA1、4和LMP1、2为靶细胞 ,以51Cr释放法检测EBV特异性CTL所识别的靶抗原。结果表明 ,EBV LMP1、2可能既是EBV特异性T细胞的刺激抗原 ,又是其识别的靶抗原。将采集的 30例试验者的各 5株单克隆T细胞株分别检测HLA Ⅰ型(A、B、C) ,按照不同型别寻找相对应的EBNA1、4和LMP1、2的不同合成肽 ,应用酶免疫吸附斑点法 (Elispot)检测EBV特异性CD8+ 的CTL应答。结果显示 :10例正常人中 9人有特异的LMP2应答 ,4人有特异的EBNA4应答 ;10例未治疗的NPC病人中 3人有特异的LMP2 ,2人有特异的EBNA1,3人有特异的EBNA4应答 ;在 10例EBV-IgA/VCA阳性中 ,6人有特异的LMP2 ,5人有特异的EBNA4应答。所有的试验者均未发现LMP1的特异性应答
2001年01期 7-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 57k] [下载次数:156 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:336 ] - 张世珍,梁米芳,董关木,郑海法,侯云德
运用噬菌体表面呈现 (phagedisplay)技术获得了人源抗狂犬病毒糖蛋白基因工程单克隆抗体Fab段基因及其表达。从狂犬病毒PM株Vero细胞疫苗免疫的人抗凝血中分离获得外周淋巴细胞 ,提取细胞总RNA ,通过RT -PCR方法 ,用一组人IgGFab基因特异性引物 ,从合成的cDNA中扩增了一组轻链和重链Fab段基因 ,将轻链和重链先后克隆入噬菌体载体 pComb3,成功地建立了抗狂犬病毒噬菌体抗体库 ,并用纯化的狂犬病毒颗粒和几株抗狂犬病毒鼠单克隆抗体 (单抗 )捕捉狂犬病毒抗原的方法 ,对此抗体库进行富积筛选表达 ,成功地获得了抗狂犬病毒的人源单抗Fab段基因及其在大肠杆菌中的有效表达。对其中一株单抗G10进行了较为系统的分析 ,发现它与一株鼠源中和性狂犬病毒糖蛋白特异性单抗存在竞争 ,证实该单抗能识别狂犬病毒糖蛋白。其序列资料分析表明 ,该单抗为一株新的抗狂犬病毒人源基因工程抗体
2001年01期 11-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 90k] [下载次数:211 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:453 ] - 方肇寅,齐锦,杨辉,王承训,叶青,马莉,唐景裕,何爱华,杜曾庆,谢健屏,卢亦愚,吴海燕,章菁,林思恩,谢华萍
轮状病毒是世界范围内引起婴幼儿腹泻的主要病原。根据病毒外壳蛋白VP4和VP7抗原性的不同可区分为不同型 :P(VP4,proteasesensitive)型和G(VP7,glycoprotein)型。 1998~ 1999年在中国 8个城市 (长春、秦皇岛、北京、杭州、福州、广州、成都、昆明 )采集了急性腹泻患儿的 10 93份非细菌性腹泻粪便标本 ,先进行A组轮状病毒(HRV)的筛选 ,其中阳性标本 433份 (39 6 % ) ,电泳型长型占优势 (96 % )。对HRV标本 ,再利用血清型特异的MAbELISA和 /或RT PCR进行G分型。结果表明 ,在 1998~ 1999年 ,在上述 8城市非细菌性腹泻流行季节 ,以HRVG1型为主要流行株 ,占阳性总数的 83 4% ,其次为G3(12 0 % )、G4(3 5 % )和G2 (3 2 % )。此外 ,有 3份(0 7% )HRV标本未能分型 ,12 (2 8% )份标本为混合感染。还结合 1982~ 1996年全国 12个地区 1382份HRV标本的分型资料 ,分析了我国HRVG血清型的流行规律。实验中又抽样选取了 12 4份G型HRV标本 ,用RT -PCR进行P分型 ,其中P[8]型 76份 (6 1 3% ) ,P[4 ]型 14份 (11 3% ) ,P[6 ]型 12份 (9 7% ) ,P[9]型 8份 (6 4% )。另外 15份 (12 1% )未能分出P型 ,有待进一步检定。实验中HRV分离株除了常见的P[8]G1(5 1 4% )、P[4 ]G2(4 6 % )毒株外 ,还检测到P[8]G3(11 0 % )、P[
2001年01期 17-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 123k] [下载次数:345 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:101 ] |[阅读次数:399 ] - 郭斐,陆柔剑,娄元梅,孙朝晖,阮力
将反向串联的痘苗病毒启动子 p11k和 p7.5k表达结构引入非复制痘苗病毒质粒载体 ,得到非复制痘苗病毒表达载体 pNEOCK11β75、pNEOCK75 11β、pNEOCK1175和 pNEOCK75 11。利用载体 pNEOCK11β75、pNEOCK75 11β及 pNEOCK11β75IL6和RVJ12 3重组病毒进行同源重组 ,分别得到非复制重组痘苗病毒RVJ12 3Δ11β75、RVJ12 3Δ75 11β及RVJ12 3Δ11β75IL6。Southern blot证实 :重组病毒RVJ12 3Δ11β75C K片段间大片段基因的稳定缺失 ,同时 β 半乳糖苷酶基因插入到缺失区内并稳定表达 ,不影响另外非必需区外源基因的表达 ,缺失区内两外源基因的表达无相互干扰 ,并且缺失区内外源基因的转录方向对其DNA复制及蛋白表达以及另外非必需区基因的表达无影响
2001年01期 24-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k] [下载次数:137 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:369 ] - 魏滨,谷淑燕,李燕,郭斐,阮力
利用非复制痘苗病毒质粒载体 pNEOCK11β75及 pNEOCK ,改造了表达EB病毒主要膜蛋白 gp35 0 /2 2 0的复制型重组痘苗病毒VMA ,构建了非复制型重组痘苗病毒VMAΔCK。该病毒能在鸡胚原代成纤维细胞 (CEF)中正常繁殖 ,而在人源细胞中不能正常繁殖。在CEF中连续传代至第 2 5代 ,经PCR证明 ,该病毒符合非复制型重组痘苗病毒的特征。经免疫荧光及免疫酶斑法证实 ,VMAΔCK可稳定表达gp35 0 /2 2 0 ,且表达水平与VMA无明显差异。VMAΔCK经腹腔免疫Balb/C小鼠 ,4周后能诱生一定水平的抗 gp35 0 /2 2 0特异性抗体 ,加强免疫 2周后该抗体水平明显升高。这一结果类似于VMA免疫Balb/C小鼠的结果。初免后 ,VMAΔCK免疫组抗痘苗抗体水平明显低于VMA免疫组 ;加强免疫 2周后 ,两组小鼠的抗痘苗抗体水平趋于一致。上述结果证明 ,所构建的非复制痘苗病毒不影响目的抗原的表达 ,也不影响该抗原的免疫原性 ,但导致病毒毒力下降 ,而且用该病毒免疫小鼠后小鼠抗痘苗病毒载体的免疫反应明显下降。
2001年01期 29-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 75k] [下载次数:102 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:408 ] - 韦莉,刘爵,曹永长,姚炜光,张方亮,周蛟,王平,毕英佐2001年01期 33页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k] [下载次数:57 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:279 ]
- 佟玉品,毕胜利,江永珍,詹美云
为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗 ,利用甲醇营养型酵母 pichiapastoris表达系统表达戊型肝炎病毒 (HEV)结构区ORF2蛋白。采用PCR方法从HEVcDNA中扩增得到的ORF2基因克隆到酵母表达载体pPIC3.5K上 ,构建成重组质粒 pPIC3.5KORF2。该质粒转化酵母菌GS115 ,经G418筛选得到高拷贝转化子。转化菌株经Mut表型鉴定后 ,用含甲醇的培养基诱导表达 ,SDS PAGE及ELISA筛选高表达活性菌株 ,放大培养后进行亲合层析纯化。在该系统中成功地表达了高生物活性的HEVORF2蛋白 ,经亲和层析纯化后扫描分析重组蛋白分子量约为 5 9kD ,纯度可达 96 %。Westernblotting证实 ,它与HEVORF2单克隆抗体有特异性反应。HEV结构区ORF2蛋白在甲醇营养型酵母中的成功表达 ,以及初步纯化得到的具有强免疫学活性的重组蛋白 ,为研制新型戊型肝炎基因工程疫苗奠定了基础
2001年01期 34-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 58k] [下载次数:241 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:415 ] - 张军,王颖彬,徐颖潇,逄淑强,张国忠,杨海杰,夏宁邵
为尽快研制出国产HTLV抗体诊断试剂 ,首先从福建HTLV流行区 1名HTLV感染者外周血细胞中克隆出HTLV Ⅰ的全长膜基因 (env) ,继而结合文献报道、PSA软件的亲疏水性分析和EPI软件的B细胞表位分析数据 ,选择了gp46中段开始延伸至 gp2 1N端 2 12个氨基酸 (aa185~aa396 )的基因 ,并在 3′端通过 (GlySer) 2 与人工合成的HTLV Ⅱ型的型特异性表位区基因嵌合 ,插入原核表达载体 pRSET ,在 E .coli中得到了高效表达 ,目的蛋白产量约占菌体总蛋白的 30 %。通过Triton X10 0洗涤 ,低浓度尿素逐步变性处理 ,8mol/L尿素溶解后纯度在 75 %左右 ,经电泳洗脱纯化 ,最终纯度可达 95 %左右 ,纯蛋白得率约 40 %。经Westernblotting检测 ,该蛋白对 4份HTLV Ⅰ型和 2份HTLV Ⅱ型血清均有较强反应 ,而对 4份阴性血清无反应 ,从而有可能用于研制HTLV抗体诊断试剂盒。
2001年01期 38-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k] [下载次数:167 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:385 ] - 许洪林,王四清,王世峰,郭斐,陆柔剑,阮力
为了寻找合适的动物模型来评价人CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)的活性 ,研究了CpG2 0 0 6等含有 5 ' GTCGTT 3'特征序列的人CpG ODN对小鼠的免疫刺激活性。在体外它们能够促进小鼠脾淋巴细胞转化 ,促进B细胞分泌IgM ,但不能诱生高水平的IFN γ。研究了CpG2 0 0 6等序列在体内作为疫苗佐剂对HBsAg免疫效果的影响 ,发现 :(1)人CpG ODN能够明显提高抗 HBs抗体水平 ,并逆转Al(OH) 3 对Thl类免疫应答的抑制 ;(2 )初免时以CpG2 0 0 6为佐剂可以使免疫应答“锁定”在Thl类免疫应答 ,而加强免疫时以CpG2 0 0 6为佐剂可以在一定程度上逆转初免时Al(OH) 3 诱生的Th2类免疫应答 ;(3)CpG2 0 0 6联合Al(OH) 3 作为佐剂的单剂量疫苗的免疫效果强于两剂量以Al(OH) 3 为佐剂的常规疫苗。上述结果表明 :小鼠可以作为动物模型用于含有 5 ' GTCGTT 3'特征序列的人CpG ODN免疫效果的研究。
2001年01期 43-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 88k] [下载次数:146 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:344 ] - 孙宪锋,董小平,张宝云,侯星生,胥爱源,赵同兴,洪涛
羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理学检测发现 ,海绵状空泡变性的检出率为 5 9% ,淀粉样斑的检出率为 17 6 %。利用免疫组化和蛋白酶消化后的Westernblotting检测证实 ,10 0 %的发病地鼠的脑组织中都出现蛋白酶抗性朊蛋白 (PrP res)。17只发病地鼠脑组织提取物中 ,PrP res的泳动位置和分子量大小完全一致 ,出现两条分子量在 2 5kD~ 31kD的反应带。尝试应用快速玻片印迹法检测病变组织中的PrP res,结果显示 ,与常规固定包埋切片的免疫组化检出效果相似。这提示脑组织印片法可成为临床检测克 雅氏病 (Creutzfeldt Jacobdisease ,CJD)患者脑组织活检标本中PrP res的快速、有效的方法。羊瘙痒因子 2 6 3K成功感染金黄地鼠再次证明 ,金黄地鼠是TSE感染因子良好的动物模型 ,发病率高 ,潜伏期短 ,发病动物PrP res的检出率明显高于典型病理改变的检出率。新生成的PrP res的电泳类型与接种的TSE因子有关 ,与宿主的个体差异无关 ,提示TSE感染因子的确存在“株”的现象。
2001年01期 48-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 110k] [下载次数:113 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:27 ] |[阅读次数:408 ] - 秦爱建,崔冶中,Lucy Lee,Aly Fadly
禽白血病病毒J亚群 (ALV J)是 90年代鉴定出的ALV的新亚群 ,其囊膜蛋白env基因序别与ALVA E亚群有相当大的差别。为研究ALV Jenv基因及其表达产物的特点 ,用PCR方法扩增出ADOL 4817毒株的env基因 ,并克隆进TA载体 ,经电泳鉴定大小为 1 7kb。将克隆出的env基因与杆状病毒pBlue Bac4表达质粒DNA连接 ,构建成转移性载体 pBac4817env ,通过与Bac N Blue杆状病毒DNA共转染 ,获得了重组病毒rBac4817env 2。该重组杆状病毒感染Sf9细胞 ,能高效表达env基因产物。免疫荧光分析结果证明 ,单克隆抗体G2或多价兔抗envgp37血清能识别Sf9细胞中重组env基因表达的特异性抗原 ;Westernblotting分析结果表明 ,表达的重组基因产物的分子量大小约为 90kD~ 94kD。用这些重组基因产物免疫鸡可以诱导鸡产生出高滴度的抗ALV J特异性抗体。这一结果提示 ,这种杆状病毒表达的重组基因产物有助于ALV Jenv基因生物学特性的深入研究
2001年01期 54-59页 [查看摘要][在线阅读][下载 109k] [下载次数:303 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:28 ] |[阅读次数:291 ] - 黄广明,张曼夫,乔素兰
人工接种 35日龄SPF鸡传染性法氏囊病病毒 ,间隔不同时间采集法氏囊、胸腺、脾、盲肠扁桃体、肾、肝和腿肌进行了原位PCR检测 ,同时观察各组织病理变化。结果无论是H毒株还是Ts毒株 ,接种后 4h肝、肾、脾等组织中即出现明显的阳性信号 ,Ts毒株 4hPI从胸腺、盲肠扁桃体、腿肌等组织中也检出了病毒基因序列。接种H毒株和Ts毒株后 2 8h和 40h ,法氏囊淋巴细胞开始出现变性、坏死。在阳性信号检出的时间上 ,法氏囊较肝、肾、脾等组织是滞后的。H毒株较Ts毒株在早期对法氏囊具有更强的侵染能力。
2001年01期 60-64页 [查看摘要][在线阅读][下载 52k] [下载次数:154 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:23 ] |[阅读次数:272 ] - 李运敏,黄兵,蔡宝祥,陈溥言
马立克氏病 (MD)是养禽业最重要的疫病之一 ,一直缺少有效的早期诊断方法。根据血清I型马立克氏病毒(MDV1)meq基因的核酸序列设计了一对寡苷酸核引物 ,分别对MDV1致瘤株 (京 - 1株 )、非致瘤株 (MD11/ 75C株、CV1988株 )、MDV2 (SB 1株 )、HVT(Fc 12 6株 )的核酸进行扩增。结果表明 :京 - 1株扩增到约 1 15kb核酸片段 ,MD11/ 75C株和CVI988株扩增到约 1 0kb核酸片段 ,而SB 1株、Fc 12 6株没得到任何扩增产物。PCR产物Dotblot结果显示 ,京 - 1株、MD11/ 75C株和CVI988株的扩增产物都与Digoxigenin标记的meq基因探针杂交 ,说明都是特异性的扩增产物。对MSB1细胞DNA及MDV感染鸡的血液及肝、肾肿瘤等DNA扩增都得到 1 15kb条带。将京 - 1株和CVI988株感染的细胞DNA混合再扩增 ,同时得到 1 15kb和 1 0kb的核酸条带 ,所以根据扩增产物大小可以区别致瘤株京 - 1株及非致瘤株CV1988株 ,这表示可从CVI988株病毒免疫鸡体内检测到MDV强毒 ,适于早期确诊强毒感染。
2001年01期 65-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k] [下载次数:111 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:277 ] - 陈焕春,周复春,方六荣,何启盖,吴斌,洪文洲
为了以国内地方分离株鄂A株为亲本构建伪狂犬病病毒双基因缺失株 ,采用外切酶Ⅲ和绿豆核酸酶酶切 ,构建了缺失主要毒力基因TK基因部分编码区的重组质粒 pSTK1-4 ,进一步改造成为转移质粒 pUCPB4。用HindⅢ将质粒pUCPB4线性化 ,然后与用EcoRI消化的伪狂犬病病毒鄂A株TK-/LacZ+ 突变株基因组DNA共转染PK- 15细胞 ,待完全病变后 ,收毒作空斑试验 ,PCR筛选TK缺失的重组病毒。重组病毒空斑纯化 3次 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所获得的病毒为均一的无TK-/LacZ+ 突变株污染的TK缺失的重组病毒。分别以TK缺失株病毒与鄂A野毒株为模板对TK基因进行PCR扩增 ,扩增产物经酶切分析和测序后发现 :TK缺失重组病毒的TK基因缺失了 2 0 5个碱基 ,XhoI和SalI位点消失 ,SmaI酶切片段发生变化。两种病毒在PK - 15细胞上形成空斑的大小和增殖的滴度无明显的差别。进一步提取TK缺失突变株基因组DNA ,与含gG -LacZ的转移质粒pUSKZ通过磷酸钙法共转染PK - 15细胞 ,待完全病变后 ,在X - gal存在下筛选蓝斑 ,将挑取的蓝斑纯化 3次后 ,对纯化的重组病毒进行TK、LacZ扩增 ,结果既能扩增出较以鄂A野毒株为模板扩增的要小的TK基因片段 ,同时又能扩增出LacZ基因 ,证实所得到的重组病毒为TK-/ gG-/LacZ+ 突变株。此双缺失突变株的构?
2001年01期 69-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 115k] [下载次数:684 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:88 ] |[阅读次数:333 ] - 赵耘,罗长宝,陈茹,林志雄,李树根,陈博文,刘尚高
利用单管RT PCR方法扩增猪生殖和呼吸综合征病毒 (PRRSV)分离株B13 株包括ORF7基因的片段 ,并对其序列进行了测定 ,结果PRRSV分离株B13 ORF7基因长度为 384bp ,编码 12 8个氨基酸组成的 15kD蛋白。与已发表的PRRSVLV株、VR 2 332株进行同源性比较 ,发现核苷酸同源性分别为 99 2 %、5 9 4% ;氨基酸同源性分别为98 4%、5 4 7%。表明PRRSV分离株B13 在基因结构上可能与LV株同属于欧洲亚群。同时构建了重组转移载体质粒 pAcGHLT B ORF7,用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV SVI-G)基因组DNA(baculogoldlinearizedbaculovirusDNA)共转染草地夜蛾 (Spodoptcrafrugiperda ,Sf9)细胞 ,得到重组病毒AcMNPV OCC- GST 6xHis ORF7。在感染了重组病毒的Sf9细胞中检测到分子量为 46kD的ORF7基因的GST融合蛋白表达产物 ,能被猪抗PRRSVB13 株多克隆血清所特异识别。此结果为PRRS新型诊断抗原的研制奠定了基础
2001年01期 75-80页 [查看摘要][在线阅读][下载 94k] [下载次数:193 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:69 ] |[阅读次数:329 ] - 王华林,陈新文,Vlak.J.M,胡志红
为了利用棉铃虫核多角体病毒 (HaSNPV) p10基因的启动子构建重组病毒杀虫剂及表达系统 ,应用末端测序法和引物步移法测定了 p10基因的序列 ,并应用Northern杂交和引物延伸实验对该基因进行了深入的转录特性分析。HaSNPV p10基因被定位于基因组DNA的 115 4kb~ 115 6kb处 ,转录方向与多角体基因相反 ,在其上下游分别发现了 p2 6和 p74基因。转录分析结果确定了 p10基因是个极晚期基因 ,其转录从杆状病毒晚期转录保守序列GTAAG的第二个A开始 ,转录产物大小约为 430nt。HaSNPVp10基因最早可检测到的转录是在病毒感染后的 2 0h ,随后其转录产物量迅速放大 ,到感染后 72h达到非常高的水平。转录时相分析同时还检测到一个大小为130 0nt的产物 ,推测该产物为 p2 6和 p10通读的转录产物。对HaSNPVP10蛋白序列的分析表明 ,该蛋白第 6~44位及第 5 1~ 6 5位氨基酸序列处含多个典型的卷曲螺旋七聚体重复结构 ,两片段间相隔 6个氨基酸残基 ,在该蛋白序列的第 2 0~ 34位与第 5 1~ 6 5位存在L -X(2 ) -L -X(10 ) -L的亮氨酸重复。Helicalnet分析表明 ,HaSNPVP10的疏水氨式酸分布为两个集簇区 ,两者互为 180度转角。
2001年01期 81-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 123k] [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:259 ] - 张昌菊,韩莉,杨建林,宋利琼
为了应用聚合酶链反应同时检测人巨细胞病毒 (CMV)、人乳头瘤病毒 (HPV)、沙眼衣原体 (CT) ,参照文献报道的基因序列 ,设计合成了三对能扩增 370bp、45 0bp、5 10bp基因片段的引物 ,并对PCR扩增条件进行了优化。 0 1fgHPV DNA、CMV DNA、CT DNA即可被检出 ,得到了与设计片段相同的产物 ,且不扩增大肠杆菌、白色念珠菌、解尿支原体等病原的核酸。对 395例标本进行检查 ,各病原体的检出率分别是 :HPV19 2 %、CMV14 9%、CT5 1%。其中混合感染 42例。PCR同时检测CMV、HPV、CT经济、快速、敏感、特异 ,可用于临床诊断和实验研究。
2001年01期 87-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 45k] [下载次数:105 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:376 ] - 张春嵋,谢荔岩,林奇英,谢联辉2001年01期 90-92页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k] [下载次数:92 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:383 ]
- 何海怀,梁国栋2001年01期 93-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 64k] [下载次数:169 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:386 ]
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