病毒学报

2007, (06) 440-446

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SARS-CoV假病毒中和试验技术的建立及评价
Development and Application of a Safe SARS-CoV Neutralization Assay Based on Lentiviral Vectors Pseudotyped with SARS-CoV Spike Protein

闫克夏;谭文杰;张相民;王慧娟;李岩;阮力;

摘要(Abstract):

为避免传统的SARS病毒中和试验需要操作活毒而存在的生物安全隐患,建立了基于假病毒系统、操作较安全的SARS中和试验技术平台。本研究应用高效表达SARS-CoV S(密码子优化的全长S蛋白,简称S)的真核表达载体(pVRC8304),与HIV慢病毒包装质粒(p CMV△8.2)及转移质粒(pHR′CMV EGFP)3个质粒载体系统共同转染人胚肾细胞293T,包装了SARS假病毒;通过SARS假病毒感染的RD-A细胞中标记基因EGFP表达的分析,确定SARS假病毒能有效进入细胞,建立了可在BSL-2级实验室操作的SARS病毒中和试验技术平台。用该技术平台对不同免疫血清进行了中和抗体分析,并比较了基于假病毒和基于SARS活病毒的中和试验效果。结果显示:SARS假病毒和SARS活病毒两个中和试验系统获得中和抗体滴度变化趋势一致,表明本研究构建的SARS假病毒可替代SARS活病毒用于建立操作上安全的SARS病毒中和试验技术平台。

关键词(KeyWords): SARS-CoV;S蛋白;假病毒;中和试验

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家863计划2007AA02Z464,病毒病预防控制所2005年SARS疾控专项经费

作者(Authors): 闫克夏;谭文杰;张相民;王慧娟;李岩;阮力;

参考文献(References):

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