病毒学报

2022, v.38(06) 1372-1381

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

含MPN结构域蛋白(MPND)通过上调乙型肝炎病毒X蛋白水平影响其功能
MPN Domain-Containing Protein(MPND) Increases Hepatitis B Virus X Protein Levels and Promotes Its Biological Functions

张翼;吴琼;施佳健;张璐;林旭;陈婉南;

摘要(Abstract):

乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)在生成后即被快速降解,但目前影响HBx稳定性的机制仍未完全阐明。课题组前期通过酵母双杂交筛选与HBx具有相互作用的去泛素化酶(Deubiqutinases,DUBs),含MPN结构域蛋白(MPN domain containing protein,MPND)为筛选获得的蛋白之一。本研究首先采用免疫共沉淀和激光共聚焦实验验证HBx与MPND的相互作用,并通过酵母双杂交实验进一步分析两者相互作用的区域。Western blot检测过表达MPND的肝癌细胞中HBx蛋白水平的变化。以蛋白合成抑制剂环己酮亚胺(Cycloheximide,CHX)或蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞,检测MPND对HBx蛋白半衰期及降解途径的影响。通过泛素化实验分析MPND对HBx泛素化水平的影响。采用双荧光素酶报告基因检测实验和克隆形成实验检测MPND对HBx生物学功能的影响。结果显示,MPND与HBx在肝癌细胞内存在相互作用,且HBx的26~50和81~120位氨基酸与MPND的272~362位氨基酸介导HBx与MPND的结合;过表达MPND的肝癌细胞中,HBx蛋白水平显著增高,HBx的半衰期明显延长,且蛋白酶体抑制剂处理后,MPND对HBx蛋白降解的抑制效果更为显著,但HBx泛素化水平没有变化;共表达MPND与HBx的肝癌细胞中,MPND通过上调HBx蛋白水平,进而促进了HBx对NF-κB启动子的反式激活作用,且进一步抑制克隆形成。本研究表明,MPND通过泛素非依赖-蛋白酶体途径抑制HBx降解,从而增加HBx蛋白水平,调控HBx功能,可能参与HBV致病机制,以此蛋白相互作用为靶标,将为HBV感染相关肝脏疾病的治疗提供有益思路。

关键词(KeyWords): 乙型肝炎病毒X蛋白;去泛素化酶;蛋白酶体;蛋白降解

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 福建省财政厅项目(项目号:2019B027),题目:去泛素化酶通过调控乙型肝炎病毒X蛋白水平影响肝细胞及病毒复制;; 国家自然科学基金项目(项目号:81672031),题目:BRG1相关因子155对乙型肝炎病毒X蛋白翻译后水平的调控及意义;; 福建省自然科学基金项目(项目号:2019J01299),题目:乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBDSP通过诱导上皮间质转化促进肝癌细胞侵袭转移机制研究;; 福建医科大学启航基金项目(项目号:2018QH2005),题目:泛素特异性肽酶USP22对乙型肝炎病毒X蛋白的影响及机制~~

作者(Authors): 张翼;吴琼;施佳健;张璐;林旭;陈婉南;

DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004217

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享