- 金顺钱,孙亚洲,张伟,梁克,明利华,王晓宏,王希霞,梁肖,侯芷瑛,商铭
把人乳头瘤病毒16型(HPV16)长控制区(LCR)及与其相连的E6—E7基因片段正向插入pSV2neo质粒,构建HPVl6 LCR E6-E7真核细胞表达质粒,转染NIH3T3细胞,用 G418作筛选药物。转化的细胞形态具有表型改变,出现非锚地依赖性生长及在裸鼠体内致肿瘤能力。Southern印迹杂交结果表明,重组质粒已整合于转化细胞的染色体上。
1991年02期 97-101+197页 [查看摘要][在线阅读][下载 1043k] [下载次数：31 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：3 ] - 宋干,黄永成,杭长寿,郝富勇,李德新,郑晓丽,刘为民,惠连,梁米芳,回良杰,霍子威,李淑兰,张全福,王晓宏,傅增武,王伟
用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025％)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。
1991年02期 102-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 211k] [下载次数：45 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：31 ] |[阅读次数：3 ] - 聂子林,俞永新
前文报道,肾综合征出血热病毒76-118株能使Vero细胞产生病变。本文报道76-118株和另11株不同来源的肾综合征出血热病毒(H537、A9、H5、R178、HB55、R22、Z10,沟3、L99、A16和J10)对Vero细胞的致病变作用(CPE )。其中除沟3株外,大部分毒株在感染Vero细胞后的第一代即可见明显的CPE。CPE的特点与76-118株相似,主要是感染细胞粘聚、融合,形成网状结构。CPE能被特异性抗HFRS病毒血清和型特异性单克隆抗体所中和抑制,但不能被特异性抗呼肠孤病毒Ⅲ型免疫血清所中和抑制。HFRS病毒对Vero细胞的致病变作用,对进一步研究HFRS病毒的某些生物学特性及实验方法等均有重要意义。
1991年02期 107-111+198页 [查看摘要][在线阅读][下载 836k] [下载次数：59 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：3 ] - 任贵方,阮薇琴,田淑芳,梅雅芳,阮力,杨安道,杨芙蓉,王申,王秀平,朱既明
使用本研究室以前构造的双拷贝乙肝病毒重组DNA质粒pSV_2DHBR2-32经改造构成pSV_2DHBR1-32。用此质粒转化CHO-dhfr~-细胞,经克隆、选择、加压增殖建立7个高产HBs-Ag的细胞系,其中首选B43对其生物学性状研究的结果说明,未发现微生物污染,无致瘤性,遗传稳定,纯度满意,核酸杂交试验说明该细胞是整合型,每个细胞约有200个左右的S基因拷贝,转瓶培养研究B43细胞分泌HBsAg的最佳条件为转瓶容积4升,表面积1300cm~2,细胞长成单层后换维持液150ml,其后每48小时收、换液1次,在36℃每小时8转,连续收液60天左右, 每升收液最高产HBsAg为7.5mg。此细胞可用作乙肝基因工程疫苗生产的候选细胞系。
1991年02期 112-119页 [查看摘要][在线阅读][下载 412k] [下载次数：136 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：21 ] |[阅读次数：3 ] - 李景赞,胡裕文,容敏清,阮力,侯云德,朱既明
木文从单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)基因组EcoRI H片段中分离出含有糖蛋白D(gD)基因的2.5kb DWA片段,插入带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的pJC—2质粒p7.5k启动子的下游,转染TK~-143细胞,获得带有HSV-1 gD基因的重组痘苗病毒。采用HSV-1 gD单克隆抗体免疫胶体金技术进行电镜观察表明,重组痘苗病毒感染的细胞内有特异性HSV-1 gD抗原.重组病毒免疫家兔后6周可产生明显的HSV-1中和抗体。
1991年02期 120-124+199页 [查看摘要][在线阅读][下载 588k] [下载次数：49 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：3 ] - 陈小毅,A.Ghosh,M.Moore,John Arrand
本文用EB病毒转化自体淋巴细胞所建立的类淋巴母细胞系(LCL),以及用EB病毒潜伏感染膜蛋白(LMP)基因和核蛋白-2(EBNA2)基因与痘苗病毒重组的重组病毒(Vac-LMP和Vac-EBNA2)感染的自身纤维母细胞,同时作为刺激细胞和靶细胞,以~(51)Cr释放法检测5例血清中EB病毒VCA—IgA抗体阳性者及1例阴性健康者外周血单个核细胞(PBMC)的特异性T细胞杀伤效应。结果表明,用自身LCL激活的EB病毒特异性T细胞杀伤效应高峰出现在第14～28天;参与杀伤性细胞免疫反应的T细胞亚群主要是T3、T8阳性的细胞毒性T细胞,其对靶细胞的识别及杀伤受HLA-I的限制。用重组牛痘病毒感染的纤维母细胞作靶细胞或刺激细胞,有1例供者可接受LMP,另1例可接受EBNA2的刺激,并对相应的靶细胞产生特异性T细胞杀伤反应,表明EB病毒-LMP和EBNA2可能既是EB病毒特异性T细胞的刺激抗原,又是其识别的靶抗原。
1991年02期 125-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 277k] [下载次数：33 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：3 ] - 孙毅,陈伯权
单克隆抗体9E6和2E9都是针对狂犬病毒糖蛋白(61kD)的两个具有中和活性的单克隆抗体,但它们分别针对两个不同的抗原位点。当它们被动转移给小白鼠后,却产生完全相反的作用。在狂犬病小鼠动物模型上,9E6抗体的被动转移可使小鼠产生对狂犬病毒攻击的保护性免疫。而在相同实验条件下,2E9的被动转移却使小鼠在受狂犬病毒攻击后产生“早期死亡”综合征。而且这种“早期死亡”综台征的发生还依赖于被动转移抗体2E9的浓度,经1:30和1:300稀释的抗体可引起早期死亡综合征,而1:3和1:3000稀释者则不能。结果提示,早期死亡综合征的发生与病毒抗原上的某个决定簇相关,并由针对此决定簇的抗体所介导。
1991年02期 132-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 150k] [下载次数：37 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：3 ] - 张海林,米竹青,施华芳,自登云
选用3株基孔肯雅病毒人工感染成年树鼩,进行了病毒血症、抗体动态变化、内脏组织病理改变和病毒在宿主体内定位的研究。结果表明,感染树鼩能产生2～6天的病毒血症。血凝抑制(Hi)抗体第6天产生,第30～50天达高峰:中和(NT)抗体在第10天产生,第30～40天达高峰,二者相关性非常显著(P<0.01)。补体结合(CF)抗体第14天产生,第40～50天为高峰,以后逐渐下降。第8～12天能在其脑、肺、肝、脾和肾等组织查到病毒,经病理检查这些内脏组织呈炎性改变和出血倾向,表明该病毒能侵袭树鼩各主要脏器。试验认为树鼩对基孔肯雅病毒敏感。
1991年02期 137-141页 [查看摘要][在线阅读][下载 189k] [下载次数：83 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：3 ] - 智刚,周园,李玉英,张智清,苏成芝,侯云德
构建了人α2a型干扰素的表达载体,并在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量平均为10~ IU/L菌液。还对其表达产物进行了纯化。经盐酸胍裂解菌体、硫酸铵沉淀、酸化处理,再经阴、阳离子交换层析和单克隆抗体亲和层析,使表达产物纯化了1072倍,比活性达1.2×IO~ IU/mg蛋白,达到序列纯,回收率达54％。表达产物N端21个氨基酸序列分析结果与IFN-α2a cDNA推导的序列相符合。
1991年02期 142-147页 [查看摘要][在线阅读][下载 238k] [下载次数：219 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：2 ] - 孔德迎,刘福安
用减蛋综合征-76(Egg drop syndrome’76)病毒WPDV205株感染31周龄莱航鸡,复制出了典型的减蛋综合征产蛋曲线,但蛋壳质量未见变化。从接种后第2周初,产蛋率由68.4％开始下降,至第4周降至43.5％。放射示踪实验表明,接种后7天,病毒分布于卵巢和输卵管的膨大部、峡部及阴道部,14天在肺和输卵管的膨大部,21天在阴道部,28天在肾和输卵管的漏斗部、峡部及阴道部。第4周后,除第8周在阴道部检出病毒外,在生殖道其它部位均未检出病毒。鸡群接种病毒后第1至4周从其蛋内容物中检测到病毒。
1991年02期 148-152页 [查看摘要][在线阅读][下载 184k] [下载次数：48 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：3 ] - 裘卫,朱国凯
本文对棉铃虫核型多角体病毒(Heliothis armigera Nuclear Polyhedrosis Vi-rus,HaNPV)在3个同源寄主细胞(SIE-HAH-806、SIE-Ha-798及SIE-Ha-806)和3个异源寄主细胞(TN-368、SIE-MSH-805和IPLB-SF-21AEC)内的复制及其感染性进行了比较研究。从病毒在细胞内形成多角体的历程和感染细胞百分率、TCID50滴度、病毒在感染细胞中复制的电镜检查,以及子代病毒对棉铃虫幼虫的活体感染性试验都证实,HaNPV在异源寄主细胞内复制要优于同原细胞。讨论了核型多角体病毒离体复制时,有关的同源和异源寄主细胞问题。
1991年02期 153-157+200页 [查看摘要][在线阅读][下载 1131k] [下载次数：59 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：3 ] - 宋干,黄永成,杭长寿,郝富勇,李德新,郑晓丽,刘为民,惠连,霍子威,李淑兰,张全福,回良杰,詹发光,王晓红,傅增武,王伟
<正> 我国地鼠肾细胞(GHKC)和沙鼠肾细胞(MGKC)培养的EHF灭活疫苗均已进行小量人体试用观察,获得了令人鼓舞的结果。我们用GHKC研制的一批EHF灭活单价疫苗(L99株家鼠型病毒)(88-17批)对12名志愿者进行接种观察,未发现明显的不良反应,接种3针后全部中和抗体阳转(酶斑减少中和试验,EF-RNT),一年后其中10人血清仍保持抗体阳性。鉴于野鼠型和家鼠型EHF病毒间存在有明显的抗原性和免疫原性差异,为获得一种对预防两型EHF同样有效的灭活疫苗,我们用GHKC适应的两型EHF病毒株(野鼠型病毒JR株,家鼠型病毒L99株)制出GHKC灭活双价疫苗90-1批(液体苗)及90-2批(冻干苗),经检定合格,卫生部批准后进行了人体试用观察。疫苗用0.025％福尔马林灭活,加Al(OH)_3佐剂0.5
1991年02期 157页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k] [下载次数：26 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：3 ] - 江永珍,张礼璧,谢景石,朱晖,李继芬,王棣华
以柯萨奇B组(Cox B)1～5型病毒感染的Vero细胞上清液作为抗原,建立了间接ELISA法和IgM抗体捕捉ELISA法(MacELISA),并分别用于检测心肌炎和非心肌炎患儿血清中Cox B1～5型病毒IgG和IgM抗体。结果IgG类抗体滴度≥6 400者,在80例心肌炎(包括30例急性心肌炎)患儿中有49例,占61.25％,50例非心肌炎患儿中有11例,占22％。两者有显著性差别,u=5.6,P<0.01。而IgM抗体的阳性率,急性心肌炎患儿为73％,心肌炎患儿为32％,总阳性率为47.5％;而非心肌炎患儿仅为8％。30例心肌炎和急性心肌炎IgM抗体阳性者中,以抗Cox B3型的百分率最高,占40％(12例);其次为2型,占33％(10例);4型占17％(5例),1型占6.6％(2例):5型占3.3％(l例)。10例急性心肌炎患儿的双份血清,间接ELISA法检测恢复期IgG抗体呈4倍以上升高或降低者有6例(60％),MacELISA法检测IgM抗体8例(80％)阳性。
1991年02期 158-163页 [查看摘要][在线阅读][下载 229k] [下载次数：56 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：3 ] - 马静雅,张礼璧,刘文军
利用聚合酶链反应(Polymerase chian reaction,PCR)对脊髓灰质炎病毒Sabin相关株进行了诊断和定型。选用的引物Map7、Map14与肠道病毒具有同源性,经扩增后产生大小为115bp的核酸片段;引物Sabin Ⅰ-1、Ⅰ-2对Ⅰ型Sabin株特异,经扩增后产生大小为97bp的核酸片段;引物Sabin Ⅱ-1、Ⅱ-2对Sabin Ⅱ型株特异,扩增产物为71bp;引物Sa-bin Ⅲ-1、Ⅲ-2对Sabin Ⅲ型株特异,扩增产物为44bp.此方法敏感性高,可检出10~(1.5)TCID_(50)/ml感染量的病毒核酸。利用PCR方法对我国各地送检的几株脊髓灰质炎病毒的定型结果,与中和试验完全一致。
1991年02期 164-169页 [查看摘要][在线阅读][下载 740k] [下载次数：36 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：3 ] - 程度胜,韩素文,项秉一,方继明
<正> 核酸序列分析表明,乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗原基因(C基因)编码区内存在两个ATG。目前认为第二个ATG为乙肝病毒C抗原的起始密码子,两个ATG之间的序列称为前C序列,共87bp。Uy、Rutter、Roossinck及景新等的研究表明,含前C序列时,C基因在大肠杆菌中的表达是形成具有HBeAg活性的P25~e膜蛋白,在哺乳动物细胞中的表达则是形成分泌性的HBeAg;不含前C序列时,在大肠杆菌和哺乳动物细胞中均形成P21~e
1991年02期 170-175页 [查看摘要][在线阅读][下载 201k] [下载次数：30 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 宋淑敏,张成良,阚晓枫,陈京,胡伟贞,张作芳,由雪娟
<正> 南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是一种既能通过种子远距离传播,又有介体带毒扩散力的危险性病毒。目前,国内尚未发现.SBMV主要危害菜豆、豇豆等在我国种植面积大、范围广的豆科植物。随着进出口贸易和种质交换日益增多,此病毒传入机会大大增加。为了提高检疫技术水平,了解病毒特性和建立快速检测技术,本文对SBMV单克隆抗体进行了初步研究。
1991年02期 176-179页 [查看摘要][在线阅读][下载 331k] [下载次数：81 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：2 ] - 陈卫平
,邵一鸣
<正> 1991年3月26日,苏联分子诊断研究中心(Research Center of Molecular Diagnostics)主任Severin教授和Kiselev教授来病毒学研究所作学术访问。 Severin主任主要介绍了免疫毒素的研究情况,他的研究小组分离出一种免疫毒素,它可以和IgG抗体结合,结合状态的免疫毒素是没有活性的,但当IgG特异性地和靶细胞结合后,毒素释放,从而特异性
1991年02期 179页 [查看摘要][在线阅读][下载 29k] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 郭蜀光,张婕,闵永洁,彭小忠,谢毅,王启松
<正> 马铃薯纺锤形块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)是一种由359个核苷酸组成的植物类病毒。本文介绍用化学法合成PSTV基因的工作。将整个基因分成173、168和18bp 3个片段,对两个大片段分别进行克隆,最后得到含有PSTY基因的单链DNA。 首先,根据PSTV的核苷酸序列得到其cDNA,将整个cDNA分成A、B、C3段,分别为1-173、174-341和342-359。为了下一步将cDNA转录到RNA的研究,在每一个片段的3’
1991年02期 180-182页 [查看摘要][在线阅读][下载 96k] [下载次数：70 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 汤显春,孙富林,戴彩云,郑茂材
<正> 1985年我们从自然罹死的乌桕金带蛾(Eupterote sapivora yang)幼虫分离到一株核型多角体病毒,经电镜观察认为是杆状病毒属(Baculovirus)中的一种病毒(简称EsNPV)。研究昆虫病毒的分子遗传学及基因重组和表达,制备安全有效的昆虫病毒杀虫剂等,首先都要纯化病毒,对其理化性质需要有较全面的了解。为此,本文对该病毒的理化性质和限制性
1991年02期 183-185页 [查看摘要][在线阅读][下载 84k] [下载次数：24 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 赵小侠
<正> Ribozyme是具有催化RNA切割反应功能的RNA,它可以有效地序列特异性地切割RNA。最近,Ribozyme的一般结构已经被证实,因此能够设计并人工合成Ribozyme,通过切割破坏RNA,阻断其功能,并抑制基因表达,包括抑制病毒的基因表达,从而有效地阻止病毒的复制和繁殖。这是近年来继反义RNA之后发现的又一个抑制基因表达的有力工具,它开辟了分子生物学的一个新领域,具有很大的潜在应用价值,因此它一出现即引起各国学者的极大兴趣。
1991年02期 186-190页 [查看摘要][在线阅读][下载 213k] [下载次数：42 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：3 ] - 陈火胜,谷淑燕
<正> EB病毒(Epstein-BarrVirus,EBV)与鼻咽癌(NPC)、伯基特氏淋巴瘤(BL)及免疫抑制后淋巴瘤等有密切关系。早在1976年,Epstein首先提出了用疫苗预防EBV相关的恶性肿瘤或减少其发病率的设想。其依据是用病毒疫苗控制动物肿瘤发生有成功先例,如用马立克氏病毒的减毒株接种鸡群,可控制鸡恶性淋巴瘤的发生;接种灭活的狼疱疹病毒(Herpesvirus Saimiri)可预防猴恶性淋巴瘤等。近几年来,在EBV抗原性分析的基础上,发现膜抗原有免疫保护作用。在研制膜抗原亚单位疫苗及基因工程疫苗中,取得了显
1991年02期 191-195页 [查看摘要][在线阅读][下载 239k] [下载次数：42 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：3 ] - 朱托夫,张礼璧,刘征利,邵锡如
<正> 柯萨奇A病毒(CoxA)型别多,分布广,不同型的病毒往往交替出现于一个地区,发生流行,故血清学调查和快速诊断十分重要。本实验用PEG 6000提取的CoxA乳鼠肌肉抗原,建立了可以适用于检测各型CoxA IgG抗体的快速、特异的ELISA方法。此法可用于临床诊断和血清学调查。 1.间接ELISA法检测CoxA-IgG的特异性 基本步骤同文献。特异性阻断试验证明,本方法的特异性好,CoxA-16和CoxA-15 IgG只能被同型病毒所阻断。
1991年02期 196页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k] [下载次数：37 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] 下载本期数据