• 我国痘苗病毒天坛株血凝素基因全序列分析

    黎志良,金奇,宇文镐,金冬雁,侯云德

    本文就痘苗病毒天坛株血凝素(VVHA)基因的核苷酸序列进行了分析,后者位于Hind Ⅲ A片段的Sal Ⅰ~Xba Ⅰ区段中,全长1391bp。自1至945bp有一长的ORF,编码34734道尔顿多肽,推导的多肽具有典型的穿膜蛋白的性质,成熟分子中有6个糖化位点(Asn-X-Thr/Ser)。VVHA分子中OH基氨基酸(Ser/Thr)含量很高,占28%,VVHA启动子具有痘苗病毒晚期启动子的特点,在启动子序列内部有一回文结构ACAAAAT/ATTTTGT,中间有5个核苷酸间隔。分子内部在核苷酸水平上(508~720)和氨基酸水平上(170~240)有一长的直接串联重复区,与WR株比较,在核苷酸水平上,结构基因有1.2%的变异,在氨基酸水平上有2.5%的变异。

    1989年01期 1-9页 [查看摘要][在线阅读][下载 313k]
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  • MT-5细胞表达HBsAg的进一步研究

    邱荣国,谢彦博,卢文筠

    进一步观察了基因工程转化细胞株MT-5中HBsAg的表达,结果表明,HBsAg的表达分泌稳定,培养48小时收获,产率最佳;培养基中的小牛血清以10%为最适,通过建立多个单细胞亚克隆株证明,MT-5细胞中HBsAg的表达存在不均一性,亚株的HBsAg表达不受糖皮质激素的诱导,但受Cd~(2+)和Zn~(2+)的诱导,且细胞能够耐受较高浓度的ZnCl_2,Cd~(2+)和Zn~(2+)的最佳诱导浓度分别为1μM和100μM,最高诱导效率为350%,最高诱导产量达2.5mg/l。 MT-5培养上清中的HBsAg经亲和层析初步纯化后,SDS-PAGE呈现两条特异性多肽,分子量为23k和27k,它们代表HBsAg的主要多肽及其糖基化产品,DNA杂交结果不但确证重组S基因存在于MT-5细胞中,而且揭示重组DNA以游离体状态存在,似乎不进行整合和重排,不同亚系细胞中重组DNA的拷贝数估算为11~27个/细胞,拷贝数与HBsAg表达量有正相关关系。

    1989年01期 10-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 750k]
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  • 甲型肝炎病毒感染2BS细胞后培养液中甲肝病毒的研究

    高峰,刘崇柏

    将5株甲型肝炎病毒(HAV)分别感染人胚肺二倍体细胞,在各株病毒的细胞培养液中,用cDAN—RNA杂交法可测到HAV RNA,但用ELISA法不能测到病毒抗原,培养液中HAV的TCID50/ml略低于细胞内的病毒滴度。PEG免疫电镜观察到,培养液内的病毒几乎全部是实心颗粒。实验表明,在不同株HAV的培养液内均可测出病毒及病毒RNA,但各株测出的时间不同,讨论了HAV的释放机制。

    1989年01期 19-23+99页 [查看摘要][在线阅读][下载 578k]
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  • 用单克隆抗体分析流行性出血热病毒的核蛋白抗原位点

    梁米芳,宋干,杭长寿,李德新,李盈盈

    17株针对流行性出血热病毒(EHFV)L99株和C4株核蛋白(50kd)的单克隆抗体(McAb),根据抗原性分析可分为组特异性、型特异性(野鼠型或家鼠型),以及反应谱不全的亚组特异性McAb。这表明,在EHFV核蛋白上不仅有组特异性抗原决定簇,而且有型特异性抗原决定簇,采用竞争性酶联免疫吸附试验,以亲和层析纯化的核蛋白傲为抗原,用这些McAb分析L99株和C4株核蛋白的抗原位点,在两株病毒核蛋白上各发现了至少7个共有的位点,3个野鼠型和两个家鼠型病毒特有的位点,组特异性抗原位点至少分布在两个独立的区域,其构象和分布在不同毒株表现不尽相同,无论野鼠型或家鼠型病毒,其型特异性抗原位点均较集中在一个独立区域内。

    1989年01期 24-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 290k]
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  • 从云南省蝙蝠中分离基孔肯雅病毒及血清抗体调查

    张海林,施华芳,刘丽华,俞永新,自登云,李兆祥,张天寿,崔五全,王志伟,国正鸣,李新年,甲利

    1986年7月,从捕自云南省西双版纳地区的棕果蝙蝠脑组织中分离出1株病毒,经理化、生物学性状及血清学鉴定,为基孔肯雅病毒,此为我国首次报道,用血凝抑制试验测定人及动物血清基孔肯雅病毒抗体,健康人阳性率为6.93%(70/1010),恒河猴为2.45%(5/204),猪为4.08%(8/197),表明云南省人及动物中存在本病毒感染。

    1989年01期 31-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 234k]
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  • 重组人γ干扰素的纯化

    张德震,吴淑华,侯云德,苏成芝

    本文对两个重组人γ干扰素高表达菌株pIFN-γ及pBV871的表达产物进行了纯化,用盐酸胍裂解菌体,硫酸铵沉淀法去除杂蛋白,酸沉淀法浓缩干扰素,然后经单克隆抗体亲和层析柱纯化,可纯化945倍,达电泳纯级,回收率达30%,比活性达7.56×10~7U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳上γ干扰素分子量约17500d。

    1989年01期 37-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 222k]
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  • Ⅰ型脊髓灰质炎病毒壳蛋白肽图谱分析

    张建文,何俊,胡凝珠,郭仁

    <正> 脊髓灰质炎病毒三个血清型的野毒株与疫苗株的全基因序列业已测出,有学者比较发现,疫苗株病毒在减毒过程中有许多基因位点发生了突变。本文用单向肽图谱分析法,对Ⅰ型脊髓灰质炎病毒野毒株(Mahoney株)和减毒株(Sabin Ⅰ株)的外壳蛋白VP1,VP2,VP3分别作了比较分析。结果发现四个有差

    1989年01期 40页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k]
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  • 编码口蹄疫病毒VP1免疫活性肽基因片段的化学合成及克隆与表达

    郑兆鑫,贺沛富,严维耀,王启松,施文,赵洪兴,周智爱,朱慈晖,徐泉兴,陈嘉棣,李致勋,施履吉

    口蹄疫病毒(FMDv)VP1蛋白质141~160位氨基酸的肽段,是免疫活性肽,含20个氨基酸,用DNA合成仪合成这段免疫活性肽基因片段,共72bp,5'端带有Eco RI切点,3'端带有BamHI切点,利用Eco RI和BamHI切点将兔疫活性肽基因片段克隆到带肴1ac启动子的基因表达载体pWR590质粒中,以O型FMDV抗体做为特异的IgG,检查FMDV抗原活性肽基因片段的表达,从210个菌落中选到有明显表达的菌株8株。

    1989年01期 41-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 273k]
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  • 河南小麦梭条斑花叶病病原鉴定、病毒提纯及其特性

    周广和,陈剑波,陈善铭

    经鉴定,我国河南邓县冬小麦上发生的一种病毒病的病原,是小麦梭条斑花叶病毒。 对病毒的分离纯化进行了研究,提出了一个简单可靠的病毒纯化程序,获得了较为理想的提纯病毒制品,提纯病毒具有典型的、核酸含量约为5~6%的线状病毒紫外吸收曲线,病毒粒体宽约12nm,长度分布从200~2000nm以上,平均粒体长度约为1000nm,在300nm、600nm及1000nm处有3个分布高峰,用提纯病毒免疫兔子获得效价为1/1024的抗血清,提纯病毒的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可检测到多条蛋白带,分子量从36.6kd至28.6kd,其中36.6kd的蛋白为病毒的外壳蛋白,其余的为外壳蛋白的降解产物。

    1989年01期 46-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 629k]
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  • P_4噬菌体——一种卫星噬菌体的特性及其DNA的研究

    钱毅,曾桂超,张迺蘅,韩复生

    本实验观察了P4噬菌体在大肠杆菌C117中的增殖过程。该噬菌体在60℃几乎完全被灭活,对紫外线有抗性,对乙醇和EDTA溶液敏感。用电镜和琼脂糖凝胶电泳对其DNA进行分析提示,P4噬菌体中除含一般的双链开环和线性DNA外,在未完全成熟时它的头部衣壳中还有一种复杂的不均一打结DNA,这种特殊构型DNA的发现将为DNA拓扑异构酶Ⅱ的鉴定及酶活力测定奠定基础。

    1989年01期 52-57页 [查看摘要][在线阅读][下载 530k]
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  • 应用组织培养的甲型肝炎病毒抗原作为酶联免疫诊断试剂

    尹卫东,龚伯玲

    用2BS细胞培养甲型肝炎病毒(HAV)TZ84株,一次性加维持液,仅培养8~10天即能稳定地大量地生产甲型肝炎病毒抗原(HAAg),可用于制备甲型肝炎酶联免疫诊断试剂。采用竞争法检测HAV抗体仅需10μl血清,1~2小时即可得出结果,与Abbott试剂相比,符合率为95%,无假阳性出现。方法简便、快速,适用于人群甲型肝炎病毒感染状况的调查,采用抗体捕捉法测抗-HAV IgM,与Abbott试剂相比,符合率为96.98%,无假阳性出现,适用于甲型肝炎的早期诊断,用于临床和流行病学调查,表明所研制的甲型肝炎诊断试剂可靠实用。

    1989年01期 58-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 168k]
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  • 应用酶联免疫吸附试验检测不同类型乙型肝炎中激活补体类HBsAg循环免疫复合物

    彭宣宪,方亮

    本文以抗人C_(?)的羊IgG为包被抗体,以HRP-HBs抗体为指示抗体,建立了可检测激活补体类HBsAg循环免疫复合物(HBsAg/C3-CIC)的C_3捕捉法酶联免疫吸附试验。检测了236例六种类型临床诊断为乙型肝炎的病人血清标本,其阳性率分别为:无症状携带者(ASC)12.9%(4/31),急性肝炎(AH)36.7%(22/60),慢性迁延性肝炎(CPH)33.3%(7/21),慢性活动性肝炎(CAH)59.6%(34/57),重型肝炎(SH)77.8%(14/18),肝炎后肝硬化(PLC)67.3%(33/49),阳性率与肝损严重程度明显相关(P<0.01)。认为HBs-Ag/C3-CIC可能在乙型肝炎病毒引起的慢性活动性肝炎、重型肝炎和肝炎后肝硬化的发病过程中起重要作用,并可作为乙型肝炎的诊断、临床分型和预后判断的指标之一。

    1989年01期 62-67页 [查看摘要][在线阅读][下载 248k]
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  • 用反向间接血凝试验快速检测轮状病毒抗原和抗体

    何孔旺,吴纪棠,林继煌,江杰元

    用兔抗牛轮状病毒(NCDV株)IgG致敏绵羊红细胞进行反向间接血凝(RIHA)试验,直接检测105份犊牛腹泻粪样中的轮状病毒,查出阳性39份,阳性检出率为37.1%,与电镜检查,核酸PAGE和ELISA相比较,符合率分别为83.3%,91.7%和98.1%。同时还建立了用反向间接血凝抑制(RIHI)试验检测人和动物血清轮状病毒抗体的方法。两法特异性好,简便快速,易于推广。

    1989年01期 68-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 168k]
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  • 干扰素研究的新进展

    金冬雁

    <正> 应病毒学研究所邀请,法国著名病毒学家和干扰素研究专家Charls Channy于1988年11月2日访问了病毒学研究所,并报告了他领导的研究小组在干扰素研究等方面的一些进展情况。他们用Northern吸印杂交等方法证明,在胚胎发育过程中,正常细胞内会产生干扰素以及白细胞介素-3、白细胞介素-6等因子的mRNA。这时出现的干扰素不是由病毒诱生,而是在血小板生长因子(PDGF)、肿瘤坏死因子

    1989年01期 71页 [查看摘要][在线阅读][下载 49k]
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  • 用生物素标记的cDNA探针检测马铃薯纺锤块茎类病毒

    张鹤龄,曹先维,IlseBalbo,LuisF.Salazar

    用生物素-11-dUTP通过缺口平移将克隆于pST-B5和pST-B14质粒中的马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)cDNA进行标记,制备了生物素标记的PSTV-cDNA探针,在硝酸纤维素膜上进行核酸斑点杂交(Nucleic acid spot hybridization,NASH),检测了提纯的PSTV-RNA,带有PSTV全序列的质粒及感染PSTV的马铃薯植株提取液,前两者可检出的最低含量分别为8pg/斑点和0.35pg/斑点。以生物素标记的pST-B14和pST-B5为探针检测感染PSTV的马铃薯植株提取汁液。可测出的最高稀释倍数分别为126和162~243。

    1989年01期 72-76页 [查看摘要][在线阅读][下载 334k]
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  • 抗家蚕浓核症病毒单克隆抗体的制备及其在诊断上的应用

    陈建国,滕俊琳,胡萃,马可

    获得6株能稳定分泌抗家蚕浓核症病毒(BmDNV)单克隆抗体(McAb)的Ⅰ杂交瘤细胞株(Bm(?)1~6)。其腹水型McAb经琼脂糖双向免疫扩散法检测,效价最高达256;用间接ELISA法测定,效价最高达250000.6株杂交癌细胞分泌的McAb均能有效地阻断BmDNV对家蚕的感染,中和指数以BmD_4最高,达1096。 建立了家蚕浓核症的抗原斑点酶标免疫方法,本法特异、灵敏、快速、简便,不仅可用于诊断,且可用于流行病学研究。

    1989年01期 77-82页 [查看摘要][在线阅读][下载 357k]
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  • 火鸡新城疫病毒的分离与鉴定

    甘孟侯,张振宇

    <正> 1988年北京某火鸡场暴发新城疫,从病鸡脾、脑组织分离到新城疫病毒(NDV)强毒株。现简要报告如下。 将病火鸡的脾和脑研磨,用生理盐水1:5稀释,接种9日龄非免疫鸡胚3只,收集24小时后死亡的鸡胚尿囊液,即为待测病毒。低温冰箱保存备用,红细胞为非免疫鸡红细胞,生理盐水洗4次,配成0.5%浓度,4℃冰箱保存。

    1989年01期 82页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
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  • 应用电镜技术对一种丹顶鹤病毒的形态学观察

    俞荣林,高锦梁,雷兆寿,王永坤

    <正> 1982年,作者以3只急性死亡丹顶鹤的肝脏病料感染雏鹅和成年鹅,引起雏鹅和部份成年鹅发病,剖检发现死鹅和死鹤的病变相似。而且死鹤的肝脏病料还能使鹅胚死亡,使鹅胚原代成纤维细胞和鸭胚原代成纤维细胞产生明显的病变。本实验的目的是利用超簿切片技术对病毒讲行初步鉴定。并观察其形态及发生。

    1989年01期 83-85+100页 [查看摘要][在线阅读][下载 624k]
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  • 从抗体阳性的甲型肝炎接触者粪便中分离出一株甲型肝炎病毒

    丛树梅,尚守礼,徐皖苏,王耀宗,陈虹,李莉,张玉梅,于珍

    <正> 几年来,国内外已相继用组织培养法分离多株甲型肝炎病毒(HAV),并已证实了甲型肝炎患者及亚临床型感染在传染本病中的重要性。但HAV在流行点的正常人群中存在短期携带的问题还尚未见报道。本文采用人胚肺二倍体细胞(2BS)从甲型肝炎接触者粪便中分离出一株HAV,并经免疫电镜、免疫荧光及参比血清鉴定等证实。现将结果报告如下。

    1989年01期 86-88页 [查看摘要][在线阅读][下载 326k]
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  • 鼻咽癌病人血清中EB病毒IgA/VCA抗体快速测定法

    皮国华,陈筝,张素香

    <正> 我们建立了检测EF病毒各种相关抗体的一系列敏感和特异的方法,并应用于现场普查及临床医院的早期诊断。检测标本中的血清抗体至少需要3~4小时,为适应临床快速检查的需要,改进了检测EP病毒IgA/VCA抗体方法,即血清与抗原和第二抗体结合的时间,由原来各30分钟缩短为10分钟,而结合温

    1989年01期 88页 [查看摘要][在线阅读][下载 22k]
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  • 临床病毒学的任务及发展

    朱关福

    <正> 本世纪40年代末以来,由于化学治疗有较大进展,对细菌性疾病的疗效明显提高,病死率大为降低,就越来越显出病毒病的重要性,在基础医学中逐步加强医学病毒学的研究,它的发展很快超过其它专业病毒学,处于领先地位。临床病毒学需有病毒学工作者和临床医生相互配合,共同了解临床上不同病毒病之间的关系,如水痘和带状疱疹,麻疹及巨细胞肺炎

    1989年01期 89-94页 [查看摘要][在线阅读][下载 358k]
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  • 甲型肝炎病毒H2减毒株的某些生物学性质

    柴少爱,张杭春,余佩华,戈静,毛江森

    <正> 猕猴试验表明,甲型肝炎病毒H2M20K5是一株减毒株。本文研究了该株在KMB17人胚肺二倍体细胞中的增殖动态、繁殖部位、病毒颗粒在氯化铯(CsCl)溶液中的浮力密度,以及该病毒的耐温性等生物学性质。 一、H2减毒株在KMB17细胞内的增殖动态 取50μl相当于7log感染滴度(荧光检测法)的H2减毒株,用适量含有2%新生牛血清的细胞培养液稀释,感染长成单层的KMB17细胞(4.5×10cm培养方瓶),35℃恒温培养,在不同培养天数(0,3,7,10,14,21,28天)各收获10瓶细胞,按本室的方法从细

    1989年01期 95页 [查看摘要][在线阅读][下载 49k]
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  • 疫苗开发中的技术进展

    阮力 ,朱既明

    <正> 我们于1988年1月30日至2月6日赴美国参加了UCLA举行的“疫苗开发中的技术进展”讨论会。来自北美、南美、西欧、东欧、亚洲、非洲及大洋洲等世界各国科学家近300人参加了会议,其中四十几名科学家做了专题发言,一百多名科学家以墙报形式展示了近年来的研究结果,内容丰富,涉及面广。从疫苗类型来看,除有经典的灭活疫苗和减毒活疫苗的报告外,更多的资料则集中在基因工程疫苗,其中多肽疫

    1989年01期 96-98页 [查看摘要][在线阅读][下载 211k]
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