- 李纯洁;张卫卫;高利萍;王远;梁冬林;肖康;陈操;董小平;石琦;
SUMO化修饰作为关键的蛋白质翻译后修饰,在神经退行性疾病的病理进程中发挥重要作用。朊病毒病是一类由朊蛋白错误折叠引起的致死性神经退行性疾病,其发病机制尚未完全阐明。本研究以朊病毒感染的SMB-S15细胞模型及139A/ME7毒株感染的小鼠模型为研究对象,系统探讨了SUMO化修饰在朊病毒病进程中的动态变化及其与朊蛋白的相互作用机制。通过Western blot、免疫荧光和免疫组化分析发现,朊病毒感染终末期小鼠脑组织及SMB-S15细胞中SUMO1修饰蛋白水平显著降低,而SUMO1的mRNA表达水平却呈现升高趋势。免疫共沉淀实验证实,朊蛋白与SUMO1存在相互作用,且病毒感染后二者的结合显著增强。同时,在不同感染阶段的小鼠脑组织中,SUMO1修饰蛋白水平在朊病毒感染后不同时间点呈先下降,再上升,再下降的趋势。本研究首次揭示朊病毒感染可导致SUMO1修饰蛋白失衡,SUMO1与朊蛋白的异常相互作用可能在朊病毒病的发病机制中发挥关键作用,为深入理解朊病毒病的分子机制提供了新的实验依据和治疗靶点。
2025年05期 v.41 1376-1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 1624K] [下载次数:138 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 肖颖;李利利;谭志熹;刘远;李金松;段招军;
为了解2023年广州市荔湾区诺如病毒胃肠炎暴发/聚集性疫情的毒株分子特征和遗传变异性,收集患者肛拭子,采用qPCR、RT-PCR分别进行诺如病毒检测与分型,并对部分样本进行全基因组测序。对序列进行系统发育分析、氨基酸序列比对、蛋白质理化性质预测,研究其分子特征及不同型别病毒的遗传变异性。结果共有14起诺如病毒疫情,共收集285份标本,其中76份诺如病毒阳性;包括9起GⅡ,2起GⅠ,3起GⅠ/GⅡ混合;成功分型8起疫情,GⅡ.17[P17]型疫情数最多。测序获得LW01(GⅠ.4[P4])、LW06(GⅡ.3[P12])、LW07(GⅡ.17[P17])毒株的全基因组序列,并建立这3种基因型数据集,其中GⅡ.17[P17]型病毒的易突变位点最多。3株毒株均未发现基因重组,均存在新的变异位点,多与氨基酸疏水性相关。本研究中,GⅡ.17[P17]是主要流行基因型,表现出高度遗传变异性。3种基因型毒株均存在氨基酸突变位点,需持续开展诺如病毒分子特征研究以监测其变异趋势,为诺如病毒疫情防控提供科学依据。
2025年05期 v.41 1385-1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 1527K] [下载次数:167 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 房恩岳;常宇桐;何畦嘉;胡孔新;
慢病毒载体因其在多种分裂和非分裂细胞中高效稳定表达的优势,已成为细胞和基因治疗领域的重要工具,但其在临床应用中可能因同源或非同源重组产生复制型慢病毒(Replication-competent lentivirus,RCL),带来潜在安全性风险。本研究通过反向遗传学技术对HIV-1 NL4-3株进行改造,删除辅助蛋白基因(Vif、Vpr、Vpu和Nef),并插入NanoLuc荧光报告基因,成功构建了遗传稳定的HIV弱毒株NL4-3-dA-NLuc。HIV-1 p24抗原检测、滴度测定及病毒基因组测序结果均显示病毒拯救成功。进一步研究结果表明,该弱毒株保留了母本病毒的CXCR4感染嗜性,但复制能力显著降低。在连续传5代后病毒基因组未突变,表现出良好遗传稳定性,且传代细胞可见明显细胞病变效应,可稳定检测到HIV-1 p24抗原及NanoLuc报告基因表达。RCL检测感染灵敏度验证实验显示,NL4-3-dA-NLuc株作为阳性对照病毒的RCL最低检测限为5TCID_(50)。本研究为RCL检测方法的优化提供了一种遗传稳定且定量灵敏的阳性对照病毒,为基因治疗产品的安全性评估提供了重要技术支持,有望推动国内RCL检测技术的规范化和广泛应用。
2025年05期 v.41 1393-1402页 [查看摘要][在线阅读][下载 1575K] [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] - 王鑫;罗鑫;潘晓玲;叶湘漓;李晓丹;
mRNA疗法具有广泛应用于各种疾病防治的潜力,将mRNA安全、有效递送至靶细胞是mRNA疗法的核心技术。近年来,研究人员开发了一种基于病毒样颗粒(Virus-like particle, VLP)的mRNA递送技术。VLP是利用病毒结构蛋白识别常规mRNA而组装形成的一种与天然病毒结构类似的颗粒,兼具病毒载体靶向递送效率高和常规mRNA安全性好的优势。甲病毒属(Alphaviruses)是最常用的病毒载体之一,本研究利用甲病毒成员委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus, VEEV)载体,首次建立了一种基于甲病毒VLP的常规mRNA递送方法。结果表明在常规mRNA中引入VEEV基因组包装信号(Packaging signal, PS)序列,可使mRNA被VEEV结构蛋白识别,并组装形成VLP释放至细胞外,VLP感染可将mRNA递送至细胞内表达目的蛋白。通过检测PS在mRNA中的位置和数量、VEEV非结构蛋白反式表达等对VLP包装和目的蛋白表达的影响,为后续VLP优化提供重要基础。本研究建立的基于甲病毒VLP的mRNA递送平台为今后mRNA递送研究提供一种新策略。
2025年05期 v.41 1403-1414页 [查看摘要][在线阅读][下载 1605K] [下载次数:99 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:7 ] - 冯秀伟;冯硕;郭亚青;李欣蓓;徐昊;牛国宇;朱禹静;
荆门蜱虫病毒(Jingmen tick virus, JMTV)作为一种新发现的分节段正链RNA病毒,其非编码区(Untranslated regions, UTR)在病毒复制周期中可能发挥关键调控作用。为阐明JMTV S3片段5'UTR和3'UTR的分子调控机制,本研究以JMTV-ZYJ4毒株为研究对象,通过构建含有S3片段5'UTR或3'UTR的绿色荧光蛋白(EGFP)及荧光素酶(Luc)报告基因重组表达质粒,系统分析了UTR元件对病毒基因转录和翻译的调控特性。结果表明,在转录调控方面:JMTV S3片段的3'UTR显著增强报告基因mRNA的转录水平(较对照组提高1.6倍),而5'UTR则表现出轻微抑制作用(降至对照的0.74倍);在翻译调控方面:5'UTR显著促进蛋白翻译效率(荧光素酶活性提升至对照的2.3倍,EGFP表达增强),而3'UTR则呈现轻微抑制作用(荧光素酶活性降至0.54倍,EGFP表达减弱)。双荧光素酶报告系统定量分析结果表明,上述转录和翻译调控结果均具有统计学显著性差异(P<0.05)。本研究首次揭示JMTV S3片段UTR存在双向调控功能:3'UTR通过促进转录,可能影响病毒mRNA的时序性表达,进而参与潜伏感染建立或免疫逃逸等生物学过程;5'UTR通过高效招募翻译起始复合体,为病毒早期感染提供蛋白合成支持。这些发现不仅为解析JMTV的致病机制提供了新视角,也为开发靶向UTR的抗病毒干预策略奠定了理论基础。
2025年05期 v.41 1415-1424页 [查看摘要][在线阅读][下载 1569K] [下载次数:67 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 吕涵潇;董婕;史海月;张曙霞;甄维;周为民;李杰;王涛;赵丰泽宽;仲松超;王衍海;
病原微生物实验室在公共卫生、科学研究、防病治病等领域发挥重要作用,它的运行管理关乎国家安全。随着实验室工作的日益复杂化和专业化,对实验室人员的能力和素质要求日渐增高,人员培训则是保障人员能力的基础。结合当前病原微生物实验室人员培训的现状和现实需求,本文设计的病原微生物实验室人员培训系统构建策略,以期满足不同类型、不同层次实验室人员的培训需求,提升实验室人员的实操能力和运维水平,确保实验室工作安全、高效进行。
2025年05期 v.41 1425-1430页 [查看摘要][在线阅读][下载 1363K] [下载次数:86 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ]
- 孙嘉文;亓娜;赵宝添;丁小满;刘辉;吕燕;
分析济南市2019-2024年儿童感染呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)的流行趋势和分子流行病学特点及RSV G基因序列的变异情况,为RSV引起的呼吸道感染的预防控制提供科学数据。2019年3月-2024年2月,在济南市某儿童医院每周采集0~14岁儿童流感样病例鼻咽拭子样本,采用多重荧光定量PCR技术进行多病原核酸检测,对符合测序标准的RSV阳性样本进行G基因片段测序。运用描述流行病学方法对采集的数据进行统计分析,使用Mega 11.0软件构建系统发育树,DNAstar软件进行一致性分析,NetNGlyc1.0、NetOGlyc-4.0在线软件进行糖基化位点预测。2019年3月-2024年2月RSV的检出率为7.08%(85/1200);年龄分布上以幼儿(1~<3岁)年龄组最高(8.71%,37/425),各年龄组阳性率之间差异无统计学意义;在季节分布上冬季最高(10.67%,32/300),RSV在不同监测年度及季节间的阳性率差异均有统计学意义。测序得到69株RSV G基因序列(A亚型30株,B亚型39株),A亚型均为ON1基因型,多数毒株发生H258Q和H266L突变(83.33%,25/30);B亚型均为BA9基因型,均发生P262T、T288I、F297S和T310I突变(100%,39/39)。2019年3月-2024年2月,济南市RSV发病具有明显季节特征,ON1型和BA9型为RSV A、B亚型的流行株,本地株与参考株相比出现多个高频氨基酸突变位点,提示应加强RSV分子流行特征的持续动态监测。
2025年05期 v.41 1431-1438页 [查看摘要][在线阅读][下载 1649K] [下载次数:243 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 王秋红;叶本新;赵光辉;徐昌斌;翟振;
为研究甲状腺癌合并EB病毒(Epstein-barr virus,EBV)感染患者病毒载量、细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK)信号通路相关蛋白与病例参数的相关性及对预后的影响,本研究选取铜陵市第五人民医院2018年6月-2022年6月收治的甲状腺癌患者182例,按照患者EBV载量分为高EBV组(62例)和低EBV组(120例)。术前检测患者ERK1、ERK2、丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(Mitogen activated extracellular signal regulated kinase,MEK)水平。记录患者TNM分期、病理类型、淋巴结转移、肿瘤大小等病理参数,随访记录患者生存情况。受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析EBV载量、ERK1、ERK2、MEK水平预测甲状腺癌合并EBV感染患者预后的价值。结果显示,低EBV组ERK1、ERK2、MEK水平均低于高EBV组(P<0.05)。低EBV组与高EBV组TNM分期、病理类型、淋巴结转移比例存在显著差异(P<0.05)。低EBV组和高EBV组累积生存率分别为92.5%和70.97%,两组生存曲线差异显著(log-rank=15.376,P<0.001)。甲状腺癌合并EBV感染患者EBV载量、ERK1、ERK2、MEK水平与TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05)。EBV载量、ERK1、ERK2、MEK水平、四项指标联合预测甲状腺癌合并EBV感染患者随访期间死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.691、0.778、0.835、0.800、0.940,约登指数分别为0.383、0.434、0.549、0.478、0.763。以上结果表明甲状腺癌合并EBV感染患者EBV载量及ERK信号通路相关蛋白与病理参数相关,EBV载量、ERK1、ERK2、MEK水平对甲状腺癌合并EBV感染患的预后具有一定预测价值。
2025年05期 v.41 1439-1444页 [查看摘要][在线阅读][下载 1324K] [下载次数:53 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 丁小莹;董志超;毛建娜;
为探讨EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)感染与溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis, UC)患者血清连蛋白(zonulin)、白细胞介素-22(Interleukin-22, IL-22)水平的关系及对病情严重程度的影响,本研究选取2020年1月-2024年12月收治的UC患者195例,经EBV-DNA检测后,根据其是否伴有EBV感染分为EBV感染组(121例)和无EBV感染组(74例)。采用改良Mayo评分评价患者病情严重程度,195例患者中轻中症患者123例,重症患者72例。检测UC患者血清zonulin、IL-22水平。采用Spearman分析EBV感染与UC患者血清zonulin及IL-22水平的相关性,UC患者病情严重程度与EBV感染、血清zonulin、IL-22水平的相关性。采用logistic回归分析UC患者病情的影响因素。采用受试者工作(Receiver operating characteristic, ROC)曲线分析EBV感染、血清zonulin、IL-22水平对UC患者病情的评估价值。结果显示,EBV感染组血清zonulin、IL-22水平高于无EBV感染组(P<0.05)。EBV感染与UC患者血清zonulin、IL-22水平呈正相关(P<0.05)。重症UC患者血清zonulin、IL-22水平及EBV感染比例高于轻中症患者(P<0.05)。UC患者病情严重程度与EBV感染、血清zonulin、IL-22水平呈正相关(P<0.05)。EBV感染、血清zonulin水平、血清IL-22水平为UC患者病情严重程度的独立影响因素(P<0.05)。EBV感染、血清zonulin、IL-22水平、三种指标联合UC患者病情为重症的曲线下面积(Area Under the Curve, AUC)分别为0.724、0.781、0.826、0.914,约登指数分别为0.448、0.475、0.576、0.722。以上结果表明,EBV感染与UC患者血清zonulin、IL-22水平相关,EBV感染、血清zonulin、IL-22水平是UC患者病情严重程度的影响因素,EBV感染、血清zonulin、IL-22水平有作为UC患者病情评估指标的潜力。
2025年05期 v.41 1445-1450页 [查看摘要][在线阅读][下载 1312K] [下载次数:108 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 青清;何丽华;邓蓉;秦榕蔚;
研究抗体血清学检测与高敏核酸检测在病毒性丙型肝炎筛查中的价值。对本院住院患者的化学发光免疫分析试验(CLIA)、荧光定量PCR检测结果进行分析。行CLIA的有11221人次,阳性率为0.68%(76/11221),抗体阳性COI在1~165之间,中位数为38.4。行荧光定量PCR检测的有17314人次,阳性率为0.29%(51/17314),病毒载量区间为3.5×10IU/mL~4.0×10~7IU/mL,中位数为1.0×10~6IU/mL。两种方法检测的阳性率均有年龄分布差异特点,41岁~60岁年龄段阳性率达到最大值。同时进行高敏核酸检测和抗体血清学检测的有8892人次,抗体血清学检测阳性率为0.70%(62/8892),高敏核酸检测阳性率为0.22%(20/8892)。若将高敏核酸检测结果视为丙型肝炎现症感染诊断的金标准,则抗体血清学检测的敏感度100.00%,特异性为99.53%,准确度为99.53%,阳性预测值(PPV)为32.26%,阴性预测值(NPV)为100.00%,Kappa为0.48。抗体血清学检测COI值与高敏核酸检测病毒载量无明显线性关系,COI值在11~50时,高敏核酸检测阳性率达到最大值。在筛查丙型肝炎中,高敏核酸检测、抗体血清学检测有较高的价值,应重视高危人群的HCV感染管理。
2025年05期 v.41 1451-1457页 [查看摘要][在线阅读][下载 1263K] [下载次数:79 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 陈凯权;郭孜玮;马进;
为探讨巨细胞病毒(CMV)感染对婴幼儿氨基酸代谢的影响及与肝炎综合征(IHS)发生的关系,本研究选取皖北煤电集团总医院2020年1月-2024年6月就诊及体检的婴幼儿80例,经CMV检测后分为CMV感染组(48例)和非CMV感染组(32例)。经临床诊断后,入选婴幼儿中有43例确诊为IHS,37例非IHS。检测婴幼儿血浆氨基酸水平,采用Spearman分析CMV感染与婴幼儿血浆氨基酸水平的相关性、婴幼儿发生IHS与CMV感染及血浆氨基酸水平的相关性。采用logistic回归分析婴幼儿发生IHS的相关性因素。采用受试者工作(ROC)曲线分析CMV感染、血浆氨基酸水平评估婴幼儿发生IHS的价值。结果显示,CMV感染组血浆Met、Cit、Tyr水平高于非CMV感染组(P<0.05)。婴幼儿血浆氨基酸Met、Cit、Tyr水平与CMV感染呈正相关(P<0.05)。IHS组血浆Met、Cit、Tyr水平高于非IHS组(P<0.05)。IHS组CMV感染患儿比例高于非IHS组(P<0.05)。婴幼儿IHS与CMV感染、血浆氨基酸Met、Cit、Tyr水平呈正相关(P<0.05)。CMV感染、血浆Met水平、血浆Cit水平、血浆Tyr水平为婴幼儿发生IHS的相关性因素(P<0.05)。CMV感染、血浆Met、Cit、Tyr水平、四种指标联合评估婴幼儿发生IHS的曲线下面积(AUC)分别为0.706、0.716、0.746、0.709、0.926,约登指数分别为0.412、0.481、0.536、0.485、0.752。以上结果表明,CMV感染会影响婴幼儿血浆氨基酸水平,婴幼儿发生IHS与CMV感染、血浆氨基酸Met、Cit、Tyr水平相关,CMV感染联合血浆氨基酸Met、Cit、Tyr水平his可作为评估IHS的参考指标。
2025年05期 v.41 1458-1463页 [查看摘要][在线阅读][下载 1308K] [下载次数:65 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] - 孙建锋;崔永攀;刘艳芳;
为探讨巨细胞病毒(CMV)与冠状动脉损伤的关系及对老年冠心病患者预后的影响,本研究选取2018年12月-2022年12月我院收治的老年冠心病合并CMV感染患者152例,检测患者血浆CMV-DNA载量,根据患者CMV载量分为高CMV组(72例)和低CMV组(80例)。所有患者随访2年,每3月随访1次,根据是否发生不良事件将患者分为预后良好组(88例)和预后不良组(64例)。检测患者血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、半胱天冬酶-3(caspase-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)水平。采用Spearman分析进行相关性评估。采用COX回归分析老年冠心病患者预后不良的危险因素。采用受试者工作(ROC)曲线分析CMV载量、血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平预测老年冠心病患者预后不良的价值。结果显示,高CMV组血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平高于低CMV组(P<0.05)。CMV载量与老年冠心病患者血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平呈正相关(P<0.05)。预后不良组血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平、CMV高载量患者比例高于预后良好组(P<0.05)。老年冠心病患者预后不良与CMV载量、血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平呈正相关(P<0.05)。CMV载量、血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平是老年冠心病患者预后不良的危险因素(P<0.05)。CMV载量、血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平、五种指标联合预测老年冠心病患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.750、0.702、0.783、0.750、0.932,约登指数分别为0.423、0.371、0.331、0.519、0.439、0.702。以上结果表明,CMV载量与老年冠心病患者冠状动脉损伤指标血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平相关,是老年冠心病患者预后的影响因素,CMV载量联合血清ICAM-1、caspase-3、TNF-α、ET-1水平可辅助评估患者预后情况。
2025年05期 v.41 1464-1469页 [查看摘要][在线阅读][下载 1281K] [下载次数:51 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 陈尚琛;董宁宁;高嘉溪;谈晓梅;李娜;罗茂青;王诗诗;朱雯琪;邓应坤;庞帅赛;刘光清;孟春春;
本研究旨在筛选并鉴定猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)NS2蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用,探讨NS2在病毒复制和宿主免疫逃逸中的潜在功能。采用FCV的NS2真核表达质粒转染CRFK细胞,同时设立空载体对照组,每组各三个样本于转染后24h收样进行LC-MS/MS质谱分析,筛选与NS2相互作用的差异蛋白。通过生物信息学分析筛选出与NS2可能存在高度相互作用的宿主蛋白,采用免疫共沉淀(Co-IP)逐一验证宿主蛋白与NS2蛋白之间的相互作用。质谱分析筛选出617个可能与NS2存在特异互作的蛋白。通过GO和KEGG分析,发现差异蛋白主要参与细胞周期调控、DNA代谢、核糖体生物发生等生物学过程。结合FCV在胞内的生活史初步判定HEXIM1、SEC62、FKBP11、RPS15A和DDX20这五个蛋白与NS2蛋白最有可能发生相互作用。最后通过Co-IP实验确认HEXIM1、FKBP11均与NS2之间存在相互作用。本研究通过质谱和免疫共沉淀技术筛选并验证了与NS2发生互作的宿主蛋白,为深入解析其在FCV增殖中的作用提供了新研究方向。
2025年05期 v.41 1470-1477页 [查看摘要][在线阅读][下载 1355K] [下载次数:194 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ]
- 牛莉娟;张宇欣;张子莫;曹增国;黄培;张海丽;王化磊;
马尔堡病毒病(Marburg virus disease, MVD)是由马尔堡病毒(Marburg virus, MARV)引起的烈性人兽共患传染病,以病毒性出血热为主要特征,病死率高达24%~88%。埃及果蝠是该病毒的自然宿主,而人类及非人灵长类动物则是其主要感染对象。近年来,由于埃及果蝠活动频繁、经济全球化进程加快,MARV外溢风险不断加大。然而,目前全球尚无获批上市的针对MARV的疫苗或特效药物,因此,研发快速精准的MARV检测方法,对全球疫情防控、保障人类健康安全意义重大。本研究将逆转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)技术与CRISPR/Cas12a分子检测系统相结合,以MARV的NP基因为检测靶标,建立了一种高灵敏度、强特异性且高效便捷的MARV核酸可视化检测方法。结果表明,该方法最低可检测到4.9×10~(-1) copies/μL的MARV重组质粒,且与尼帕病毒RNA、埃博拉病毒RNA等多种病毒不存在交叉反应。本方法为MVD的早期诊断与防控提供了重要技术支撑,在临床诊断、疫情监测及公共卫生安全领域具有较高的应用价值。
2025年05期 v.41 1478-1487页 [查看摘要][在线阅读][下载 1545K] [下载次数:214 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 陆泳锟;张德雄;王晓虎;陈晶;黄元;马惠海;李学泓;陈翔宇;黄淑坚;王刚;
为建立一种可快速、特异、高效检测牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)的实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank数据库BEV流行毒株5’UTR保守基因序列设计合成特异性引物及探针,并以BEV阳性核酸5’UTR基因序列构建的标准质粒为模板,采用矩阵法对引物和探针浓度、退火温度进行优化及绘制标准曲线,同时进行灵敏性、重复性及特异性验证和临床样本检测。结果表明,该检测方法在重组质粒标准品模板浓度为4.05×10~2~4.05×10~9拷贝/μL范围内呈现良好的线性关系,相关系数R~2为0.9975,线性方程斜率为3.4539,扩增效率为94.7%,最低检测限度为4.05×10~2拷贝/μL,比常规RT-PCR检测方法灵敏度高100倍;组内和组间的变异系数均小于0.8%;与牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea mucosal disease virus,BVDV)、轮状病毒(Rotavirus,RV)、牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)和牛流行热病毒(Bovine ephemeral fever virus,BEFV)均无交叉反应。应用该检测方法对牛场采集的36份腹泻牛的粪便样品和24份肛拭子样品进行检测,检测阳性率分别为94.44%(34/36)和91.67%(22/24)。经试验验证表明,该检测方法具有较好的灵敏性、重复性及特异性,可应用于牛常规临床样本中BEV的鉴别诊断,为BEV的防控提供了有力的技术支持。
2025年05期 v.41 1488-1498页 [查看摘要][在线阅读][下载 1599K] [下载次数:208 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 倪书婷;吴琼;杨克礼;田永祥;李畅;郭锐;朱佳佳;高婷;刘威;袁芳艳;刘泽文;杨玉莹;周丹娜;
猪轮状病毒(Porcine rotavirus virus, PoRV)是哺乳仔猪病毒性肠炎和腹泻的主要病原体之一,给养猪业造成了重大的经济损失。2024年5月,山西某规模化猪场仔猪发生严重腹泻,为确定其致病病原,采集该猪场腹泻仔猪粪便样本,经RT-PCR初步鉴定为PoRV感染,利用MA-104细胞分离病毒,进行间接免疫荧光,并在电镜下观察形态特征,最终发现该病毒粒子直径约为65 nm,呈车轮状,符合PoRV粒子典型形态特征,确认成功分离鉴定了1株PoRV,并将其命名为SX2024。进行全基因组测序及分析,采用MEGA软件构建系统进化树,分析其基因型及遗传演化关系,发现该毒株的VP6基因序列与国内A群GD株的同源性为97.99%,基于VP4和VP7基因序列分析表明,SX2024毒株与P[23]基因型和G9基因型相似性最高,结合其他基因组系统进化树分析,最后确认该分离株为G9-P[23]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1型,遗传进化分析显示该毒株的VP1基因序列与人源轮状病毒相应基因序列同源性最高,提示该毒株可能是猪-人重配毒株。同时,利用该病毒进行乳鼠致病性实验,表现出明显的腹泻症状。本试验结果丰富了PoRV基因组学和分子流行病学的相关研究资料,为PoRV的致病性和分子生物学特性的研究以及PoRV G9优势基因型新疫苗的研发奠定了基础,为PoRV的防控提供了数据支持。
2025年05期 v.41 1499-1510页 [查看摘要][在线阅读][下载 1901K] [下载次数:272 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 马筱芮;林元清;阚威;易乐;黎杨;李秀英;李雪梅;郑思思;魏梦君;柴晖丽;王金黎;多杰扎西;涂长春;朱国强;何彪;
牦牛(Bos grunniens)是我国西部高原地区重要的经济动物之一。2024年初,青海某地牦牛出现了以腹泻为主要特征并伴随呼吸道症状的疫情,病死率高达67.50%,常规病原检测发现了牛多杀性巴氏杆菌感染。为进一步排查病因,我们结合Nanopore和Illumina病毒组技术、分子检测、遗传演化对临床病料进行分析。运用基于Nanopore测序的病毒组技术,在接收到样品后最快9 h便发现了牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)的信息;在随后的24 h测序中,结合Illumina测序结果,我们发现BVDV是主要病毒,并存在BVDV-1、BVDV-3、A型轮状病毒和传染性鼻气管炎病毒的混合感染,因此推断,此次疫情可能是以BVDV和牛巴氏杆菌为代表的多病原混合感染导致的。本研究示例了Nanopore测序技术在未知疫情的辅助诊断中具有显著的快捷优势,但同时也存在准确度不足的问题;相关数据进一步说明病毒细菌混合感染是规模化养殖疫病防控的重要问题,严格落实生物安全管理制度是解决该问题的关键措施之一。
2025年05期 v.41 1511-1521页 [查看摘要][在线阅读][下载 1922K] [下载次数:66 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 刘朔;彭程;毛秋艳;杨吉喆;蒋文明;刘华雷;
当前H5N1亚型禽流感疫情在全球范围内肆虐,且病毒不断变异,因此需要持续对检测方法的有效性进行评估。近年来,我们在临床样品检测过程中发现,国家标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2020)中H5亚型高致病性禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法存在扩增曲线荧光值偏低的现象,对结果判定产生一定干扰。基于国标引物和探针序列与当前流行毒株的匹配性评估分析,我们设计和优化了上游引物和探针序列,并对优化方法的特异性、灵敏度和临床样品检测效果与国标方法进行了对比。结果显示,该优化方法特异性强,与其他亚型AIV和常见禽类病原体均无交叉反应;针对2.3.4.4b分支H5亚型病毒的检测灵敏度较国标方法提高了10倍,针对2.3.4.4h分支H5亚型病毒的检测灵敏度与国标方法类似;组内和组间试验Ct值变异系数介于0.17%~1.58%,具有良好的重复性;对48份家禽和野禽咽肛拭子样品检测,本优化方法检出阳性样本38份(国标方法检出37份),其中64.9%(24/37)阳性样品的Ct值较国标方法低2以上。结果表明,本研究优化的荧光RT-PCR方法可为H5亚型高致病性禽流感病毒的流行病学调查监测及快速诊断提供技术支持。
2025年05期 v.41 1522-1530页 [查看摘要][在线阅读][下载 1593K] [下载次数:188 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 杨洪兴;温贵兰;杨颖;徐飞;王怡然;熊倩;陆小玉;王鹏程;梁康丽;何琴;苏芝乾;李波;邓乔木;
为全面了解贵州省J亚群禽白血病病毒(Subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)囊膜(Envelope, env)基因的遗传进化特征和关键位点,本研究对该省2020-2024年收集的18份阳性血浆样本进行了病毒分离鉴定、env基因遗传进化分析、关键位点分析及AlphaFold2结构预测分析。结果显示,成功获得18株ALV-J,其中17株属于Clade1.3,1株属于Clade1.2;与原型株HPRS103的gp85相比,16株分离株的第61位氨基酸残基存在缺失,其中10株还存在第117位氨基酸残基缺失;5株分离株第123位氨基酸残基由N突变为I;结构预测发现第61、117位同时缺失导致aa38-131区域缺失一个β折叠和N123I突变导致aa38-131区域形成一个α螺旋。研究表明,Clade1.3分离株为贵州省优势型流行毒株,在各地区迅速传播和蔓延,其分离株在地方品种鸡适应后在更多的品种中流行;分离株在第61、117位点同时缺失以及第123位点突变的关键位点变异可能增强病毒复制能力。本研究从env基因层面首次系统揭示了贵州省ALV-J的遗传进化动态,为该地区家禽种业禽白血病的精准防控提供了科学依据。
2025年05期 v.41 1531-1542页 [查看摘要][在线阅读][下载 3634K] [下载次数:174 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 周昊然;苏潼键;张路捷;孙杨杨;孙海凤;费中杰;白娟;姜平;
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)因其高度的遗传变异,导致防控困难,对全球范围内的养猪业造成巨大经济损失。本研究采用猪肺泡巨噬细胞分离获得3株PRRSV类NADC30毒株LY2307、QJ2306和YT2307,其中LY2307可感染Marc-145细胞,QJ2306和YT2307不感染Marc-145细胞。病毒全基因组测序分析结果显示,3株病毒与PRRSV NADC30毒株基因同源性最高,达91.0%~91.6%,全基因组进化树分析显示,3个分离毒株与NADC30毒株位于同一分支,Nsp2蛋白均具有NADC30毒株“111+1+19aa”的缺失模式,GP5蛋白中多个抗原表位存在氨基酸突变。基因重组分析显示,LY2307和QJ2306为NADC30分别与VR-2332和JXA1的重组病毒。生物信息学方法分析病毒Marc-145细胞适应性分子特性,结果显示PRRSV GP2a第78、97和98位氨基酸、GP3第18位氨基酸和GP4第57位氨基酸可能为影响病毒感染Marc-145细胞的关键位点。上述结果表明,本研究3个PRRSV分离毒株均属于类NADC30毒株,但其基因来源、分子特征和细胞适应性存在明显差异,从而加强我国PRRSV流行毒株监测及其分子特征和生物学特性研究,对该病防控和新型疫苗研究具有重要意义。
2025年05期 v.41 1543-1553页 [查看摘要][在线阅读][下载 2100K] [下载次数:231 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ]
- 黎婷;朱惠芳;
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)是引起呼吸道感染性疾病的主要病原,几乎所有成人在儿童时期都经历过RSV的感染、甚至反复感染。RSV原发性感染通常导致下呼吸道的细支气管炎和肺炎,全世界每年超过300万人住院,约66 000人死亡,是威胁人类健康以及全球公认的疾病负担沉重的公共卫生问题。在RSV感染过程中,天然免疫是抑制病毒感染和复制的第一道防线。然而,在与宿主长期的博弈过程中,RSV进化出多种机制来逃避宿主的天然免疫监控,从而在机体中建立有效的感染。本文系统综述了在RSV感染过程中,宿主天然免疫系统对病毒的免疫识别作用,以及病毒的天然免疫逃逸机制,不仅能全面认识病毒与宿主天然免疫之间的相互关系,而且为抗RSV感染的药物治疗以及疫苗的开发提供新思路。
2025年05期 v.41 1554-1564页 [查看摘要][在线阅读][下载 1476K] [下载次数:540 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:2 ] - 郑金凤;韩桃利;陈昱达;赵剑虹;
急性呼吸道感染是全球范围内传染性疾病发病和死亡的主要原因之一,其主要病原体包括病毒、细菌、真菌、衣原体和支原体等。由于不同病原体导致的呼吸道感染常呈现相似的临床症状,仅依靠临床表现难以实现准确鉴别诊断。因此,建立快速、准确的呼吸道病原体检测技术对于临床及时治疗、疫情防控及传播阻断至关重要。目前,实时荧光PCR因其具备快速、准确、单管封闭的优势成为应用较为广泛的检测方法。但是,该方法的单管检测通量受限于PCR仪荧光通道数目,一管通常只能同步检测4~6种病原体。随着多色探针熔解曲线分析技术的出现,这一技术克服了荧光通道的限制,在保留荧光PCR技术优势的同时,通过多荧光通道和熔解温度(Melting temperature, Tm)值的差异分析,即可实现单管检测覆盖整个症候群的病原谱。因此本文系统综述熔解曲线技术在呼吸道病原体检测中的研究进展。
2025年05期 v.41 1565-1572页 [查看摘要][在线阅读][下载 1314K] [下载次数:94 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 税丹;杜永丽;罗妤菲;修鹏;
甲型流感病毒是人类最重要的病原体之一,可导致大量季节性和大流行性感染,尤其是儿童流行感染,进而引发较高的发病率和死亡率。甲型流感病毒感染引起的呼吸道感染性疾病具有极高的传染性、发病率及病死率,其感染机制较为复杂,尚未得到全面阐述。本文总结了甲型流感病毒感染过程中在分子水平上病毒与宿主相互作用,并重点阐述了一些关键的细胞反应。本文还讨论了免疫介导的甲型流感病毒清除机制、促进免疫反应或引起肺损伤的机制、流感病毒诱导损伤后的肺部再生过程,以及预防流感最新研究进展,为后续研究提供相关思路及理论指导,以期为流感病毒引起的疾病带来新的有效诊疗方法。
2025年05期 v.41 1573-1580页 [查看摘要][在线阅读][下载 1321K] [下载次数:238 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 颜可昕;王佳楠;杨乐涵;王美琳;刘哲辰;邱红玲;
人腺病毒(Human adenovirus,HAdV)是一种无包膜的二十面体对称型线性双链DNA病毒,属于腺病毒科、哺乳动物腺病毒属。HAdV常感染6个月至5岁的儿童,可引起肺炎、急性胃肠炎等疾病,腺病毒肺炎是造成婴幼儿肺炎致残和死亡的重要原因之一。目前临床上缺乏理想的特异性药物,而中和抗体能够与病毒结合从而特异性抑制病毒感染,在HAdV的治疗中展示出良好的应用前景。本文综述了近10年HAdV中和抗体的研究进展,总结了HAdV中和抗体的靶向位点、抗原表位以及中和活性,为进一步研发HAdV中和抗体药物提供参考。
2025年05期 v.41 1581-1593页 [查看摘要][在线阅读][下载 1612K] [下载次数:296 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:1 ] - 杨倩;赵倩;王莹莹;彭永海;
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染已成为全球范围内的公共卫生问题,有较强传染性,母婴传播是重要传播途径之一,过半感染HBV的儿童均为母婴传播所致。母婴阻断对HBV感染的控制有积极作用。本文总结了HBV母婴阻断策略、常用抗病毒治疗药物、治疗时机、母婴阻断护理,有助于进一步探讨HBV母婴阻断的新方法,以减少HBV的传染与危害。
2025年05期 v.41 1594-1599页 [查看摘要][在线阅读][下载 1273K] [下载次数:173 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] - 肖荣;肖丽萍;王美华;黄梦姗;刘萍萍;曾庆芳;付丹;
慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)感染是一个全球公共卫生问题,若抗病毒治疗不及时可导致疾病发展为慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B, CHB)、肝硬化和肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)等疾病,严重影响患者健康。近年来,血清炎症因子及免疫功能指标在慢性HBV感染中的应用逐渐受到关注,对临床评估肝功能损伤程度和疾病发展进程具有重要价值。本文综述了血清炎症因子及免疫功能指标在慢性HBV感染中的作用,以及在疾病诊断、治疗监测和预后评估中的应用进展,以期为临床诊疗慢性HBV感染提供科学参考依据。
2025年05期 v.41 1600-1608页 [查看摘要][在线阅读][下载 1338K] [下载次数:142 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 姜佳雨;李忠原;范灵渊;廉翔宇;刘春晖;张成成;陈成龙;吴科锐;杜瑞坤;崔清华;
亨尼帕病毒属于副粘病毒科亨尼帕病毒属,其代表成员为尼帕病毒和亨德拉病毒。亨德拉病毒和尼帕病毒是人畜共患病原体,有广泛的宿主群体,通过天然宿主狐蝠直接或间接感染,感染后诱发全身性血管炎,对呼吸系统和中枢系统的影响尤为严重。本综述围绕亨尼帕病毒的结构、复制周期、致病机理及防治策略进行了全面总结,以期为相关基础病毒学及疫苗和抗病毒药物研发提供重要参考。
2025年05期 v.41 1609-1618页 [查看摘要][在线阅读][下载 1484K] [下载次数:210 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 匡雪凤;贾鑫华;王哲;孙榕静;吴婷;赵方辉;乔友林;
探索中国女性高危型人乳头瘤病毒(High-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的自然转归状况,以指导开展正确的健康教育以及HPV感染相关的治疗药物或疫苗的研发。从PubMed,Embase,CNKI,万方等数据库中检索和筛选自建库以来至2024年5月有关中国女性HR-HPV感染自然消退以及持续感染相关的文章。使用纽卡斯尔-渥太华量(NOS)评估所纳入文献的质量,采用随机效应模型计算HR-HPV感染的自然转阴率(95%CI)以及HR-HPV感染的持续阳性率(95%CI),并分析随访时间与HR-HPV自然转阴率、HR-HPV持续阳性率之间的关联。最后通过漏斗图、Egger′s检验评价发表偏倚,采用敏感性分析评估合并参数值的稳健程度。共纳入54篇文章,涉及HR-HPV持续感染的文章共52篇,HR-HPV感染自然转阴的文章共51篇,NOS量表评分均≥5分共53篇。随访时间为6个月、12个月、24个月、36个月时,中国女性HR-HPV感染自然转阴率分别为0.3033(0.2238,0.3892),0.5174(0.4559,0.5786),0.6538(0.5834,0.7210),0.7608(0.6642,0.8455)。HR-HPV持续阳性率分别为0.6780(0.5897,0.7603),0.4528(0.3930,0.5133),0.2963(0.2319,0.3649),0.2294(0.1378,0.3362)。随着随访时间的延长,在中国高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)的自然清除率逐渐增加,持续感染率逐渐下降。到了36个月时,约有22.94%的女性仍呈HR-HPV持续阳性。这一数据对于正确进行健康教育以及指导后续HPV感染相关的治疗药物或疫苗研发具有重要意义。
2025年05期 v.41 1619-1632页 [查看摘要][在线阅读][下载 1955K] [下载次数:1016 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:1 ] - 郑海涛;丁樱;任献青;胡晓娜;赵倩义;李向峰;孙晓旭;张慧娟;刘玲玲;张骁;闫永彬;
EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)作为一种广泛存在于人类社会并传播的疱疹病毒,其感染对机体免疫应答系统产生深远影响。本文将从EBV感染的免疫学基础、感染机制、宿主免疫应答反应、免疫逃避、细胞因子的分泌及其功能等方面进行详细综述,这对深入了解机体感染EBV后的宿主免疫应答特点,为后续EBV疫苗研发、相关疾病的预防和诊治具有重要的促进意义。
2025年05期 v.41 1633-1641页 [查看摘要][在线阅读][下载 1348K] [下载次数:438 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 吕雯雯;周磊;吴嘉;孙乐;钱雯;程继帅;段永忠;
人类单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type I,HSV-1)是一种在世界范围内各类人群中广泛携带和传播的重要病原体。HSV-1感染能引起包括口唇疱疹、病毒性角膜炎和病毒性脑炎在内的多种疾病。不论是在HSV-1的裂解感染、潜伏感染或是再激活感染过程中,其所编码的蛋白和miRNAs都与宿主细胞因子发生着复杂的相互作用,这些相互作用的结果影响着宿主细胞的生理过程和HSV-1的复制。本文综述了近年来宿主因子在HSV-1复制过程中的调控作用及其机制,为抗HSV-1药物和疫苗研发提供新的思路。
2025年05期 v.41 1642-1655页 [查看摘要][在线阅读][下载 1515K] [下载次数:321 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] - 尤婉玲;耿澳华;胡靖;付亚男;陈红英;刘龙;
RNA 5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine, m~5C)修饰是一种重要的表观转录组调控机制,在RNA稳定性、翻译调节和细胞代谢等方面发挥重要作用。本文系统综述了不同RNA类型m~5C修饰的生物学意义,总结了m~5C不同检测技术的最新进展,分析了其优缺点;深入讨论了RNA m~5C修饰在不同病毒感染中的作用机制,揭示其在病毒复制、基因表达调控及宿主抗病毒免疫中的功能。本文总结了m~5C修饰对RNA功能及病毒复制周期的调节作用,为抗病毒药物的开发及新型疫苗设计提供了新的视角和思路。
2025年05期 v.41 1656-1663页 [查看摘要][在线阅读][下载 1323K] [下载次数:168 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 王瑞雪;邹粤;裴晓方;陈嘉熠;
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是一种新型软电离有机质谱。近年来,MALDI-TOF MS技术凭借操作简单、检测速度快、灵敏度高等优点,在微生物检测方面展现出巨大的应用潜力。然而,相较于MALDI-TOF MS应用于细菌和真菌检测的报道,该技术在病毒检测方面的报道相对较少。因此,本文就MALDI-TOF MS在病毒鉴定、分型、耐药基因检测中的应用进行综述,以期为该技术的后续应用提供思路。
2025年05期 v.41 1664-1671页 [查看摘要][在线阅读][下载 1403K] [下载次数:423 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 张源源;王延群;
近年来,噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-Seq)逐渐成为研究人类感染病毒抗体谱的有效工具。该技术结合了覆盖全蛋白质组的噬菌体展示肽段文库以及二代测序,能够高效鉴定血清中与抗原结合的特异性抗体,从而全面揭示个体或群体的体液免疫特征。相较于传统的血清学技术(如ELISA、Western blot等),PhIP-Seq具有通量高、成本低、覆盖广、灵活性好的优势,可同时检测数百万种肽段,适用于大规模流行病学调查和疫苗评估。本综述简要介绍了PhIP-Seq的技术原理,包括文库设计、免疫沉淀富集及生物信息学分析流程,并重点探讨其在病毒感染研究中的应用进展。在疾病预防领域,PhIP-Seq已成功用于描绘包括新冠病毒、卡波西肉瘤疱疹病毒等病毒的精细表位图谱和追踪疫苗诱导的抗体动态变化;在临床诊疗中,其不仅能够辅助诊断核酸阴性感染,还可以预测非感染性疾病的风险。然而,尽管PhIP-Seq在线性表位检测方面表现优异,但仍面临构象表位漏检、翻译后修饰缺失等挑战。随着新发传染病的不断出现,PhIP-Seq在抗体谱解析、免疫记忆监测及精准医疗中的潜力将愈发凸显。
2025年05期 v.41 1672-1679页 [查看摘要][在线阅读][下载 1353K] [下载次数:67 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 赵焱;
在高等级生物安全实验室,含高致病性病毒的样本偶尔发生交叉污染,这种污染不仅可造成质量控制问题,而且可导致生物安全事故。本文分析了高等级生物安全实验室内高致病性病毒交叉污染的若干案例,从时间和空间角度分别讨论了病毒的操作交叉点和保藏交叉点,提出了预防交叉污染的交叉点管理策略,这些策略包括空间隔离、时序隔离、任务隔离、保藏隔离和定期监测。任务隔离可分开各任务并优化实验安排,降低交叉污染发生的概率。定期监测可提前发现交叉污染,避免生物安全事故的发生。
2025年05期 v.41 1680-1684页 [查看摘要][在线阅读][下载 1289K] [下载次数:237 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ]