猴痘病毒（Monkeypox virus,MPXV）是一种能够感染人和动物的痘病毒，已对人类公共卫生安全构成巨大威胁，安全高效的疫苗能够有效预防和控制病毒的传播。本研究选取MPXV A29L、A35R和M1R氨基酸序列通过柔性Linker(GGGGS)连接设计融合蛋白，并根据大肠杆菌密码子偏嗜性对其密码子优化后合成全基因，插入pET-28a载体，构建pET28a-A29L-A35R-M1R重组质粒。转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达，经SDSPAGE和Western blot进行鉴定，并确定最佳诱导条件。在此基础上，对融合蛋白rA29L-A35R-M1R进行Ni-NTA亲和层析柱纯化后，免疫小鼠。通过ELISA方法检测抗MPXV A29L、A35R和M1R特异性IgG和细胞因子（IFN-γ、IL-2和IL-4）水平，评价融合蛋白免疫原性。实验结果显示：重组质粒pET-28a-A29L-A35R-M1R在E.coli BL21(DE3)感受态细胞中成功表达，最佳表达条件为37℃、0.25 mmol/L IPTG诱导5 h；将纯化的融合蛋白rA29LA35R-M1R免疫小鼠3次后，能够产生抗A29L、A35R和M1R特异性IgG，其中anti-rA29L-A35R-M1R IgG水平最高，且融合蛋白rA29L-A35R-M1R能够刺激机体产生高水平IFN-γ,IL-2和IL-4，与对照组差异均具有统计学意义（P<0.01）。由此表明，融合蛋白rA29L-A35R-M1R具有良好的免疫原性。为猴痘病毒新型疫苗和治疗性生物制剂的研发提供理论依据。
新型冠状病毒感染疫情对全球医疗救治体系提出了前所未有的严峻考验，尽管当前疫情传播得到有效控制，但是新型冠状病毒感染相关并发症以及“长新冠综合征”给健康带来的负面效应仍不容忽视，尤其是心血管循环系统更是严重急性呼吸综合征冠状病毒2易感的靶器官。微小RNA是调节重要生物学进程的内源性小分子单链非编码RNA，已证实微小RNA在心血管疾病的发生发展进程中扮演重要角色，并且循环微小RNA差异表达与新型冠状病毒感染并发心血管系统疾病密切相关，然而循环微小RNA在疾病病理进展中的作用机制尚不明确。因此，本文综述了循环微小RNA在新型冠状病毒感染并发心血管系统疾病中的作用及相关机制，同时对基于循环微小RNA为靶点的诊疗策略进行展望，以期为新型冠状病毒感染并发心血管系统疾病的防治提供新思路。
传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）是造成临床鸡群出现呼吸系统和泌尿生殖系统疾病的重要病原，病毒本身易发生突变和重组，造成新型变异毒株的不断出现，且与常规疫苗毒株之间的抗原性存在很大差异，给临床免疫防控造成了巨大困难。因此对当前我国流行的IBV毒株进行持续性的分子流行病学监测，对于有针对性的研发新型IBV疫苗具有重要的指导意义和参考价值。本研究对2021-2023年我国临床分离到的32株IBV毒株进行了S1蛋白编码基因的序列测定和分析，并对其共同变异位点进行了蛋白功能性预测。研究结果发现，在32株IBV毒株中有22株位于GI-19分支，且进一步独立形成两个小的分支，分支内毒株的同源性均大于98.08%，分支之间的同源性在96.35%～98.02%，而与本实验室分离到的早期经典GI-19分支毒株-强毒株SD同源性低于95.33%，与自然致弱疫苗株SZ之间的同源性在95.99%～98.04%。2株毒株位于GI-22分支，与LDT3毒株的遗传距离较近。另外有3株分离株为GI-1和GI-13类疫苗毒株。需要注意的是，GVI-1基因型分离株逐渐增多（4/32），与常规疫苗株同源性约为68%；另有1株分离株与其余基因型毒株同源性均<78%，需要对其致病性和免疫原性进一步分析。综上所述，我国当前IBV流行毒株仍然以GI-19分支为主，但与此同时新分离株与经典毒株之间出现了较大变化，呈现出独立小分支的演变趋势，需要引起关注和重视。
大口黑鲈弹状病毒病是引起大口黑鲈幼苗暴发性死亡最严重的疾病，为满足大口黑鲈幼苗弹状病毒（Micropterus salmoides rhabdovirus, MSRV）的快速检测，建立大口黑鲈弹状病毒SYBR Green qPCR检测方法。根据大口黑鲈弹状病毒核蛋白基因的保守序列设计qPCR引物，对反应体系进行优化，制作标准曲线，并进行灵敏度、重复性和特异性测试，建立染料法qPCR检测方法，并在临床标本和人工感染鱼组织样品中进行应用。结果表明，构建的标准曲线，模板量与Ct值之间具有良好的线性关系，相关系数R2为0.9994，检测灵敏度达到4.5拷贝/μL，除MSRV、鳜弹状病毒（Sinipercachuatsirhabdovirus,SCRV）、杂交鳢弹状病毒（Hybridsnakeheadrhabdovirus,HSHRV）和斑鳢弹状病毒（Channamaculatarhabdovirus,CMRV）外，对其他7种病毒大口黑鲈蛙虹彩病毒（Largemouth bass ranavirus, LMBV）、传染性脾肾坏死病毒（Infectious spleen and kidney necrosis virus, ISKNV）、神经坏死病毒（Nervous necrosis virus, NNV），传染性造血器官坏死病毒（Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV）、鲤春病毒血症病毒（Spring viraemia of carp virus, SVCV）、草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus, GCRV）和黄颡鱼小RNA病毒（Yellow catfish picornavirus, YCPrV）都无扩增荧光信号；在对45份临床样品的检测中，建立的qPCR检出阳性率比套式PCR高11.11%；对人工感染MSRV的不同规格（1 g/ind、3 g/ind、8 g/ind）大口黑鲈各组织检测结果显示，脾脏中病毒载量最高，并且大规格鱼苗（8 g/ind）组织中病毒载量要低于小规格鱼苗（1 g/ind、3 g/ind），表明小规格鱼苗更易感。以上结果表明，建立的大口黑鲈弹状病毒SYBR Green qPCR检测方法是一种适合临床样品检测的特异性强、灵敏度高、稳定性好的MSRV定量方法。该方法的建立为MSRV疾病检疫提供了可靠的技术手段。
为探究血清C反应蛋白（C-reactiveprotein,CRP）、免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)以及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在儿童重症腺病毒肺炎（Severe adenoviral pneumonia,SAP）早期诊断中的价值，本研究选取2020年2月-2023年5月新疆阿勒泰地区人民医院儿科收治的98例腺病毒肺炎患儿，按病情分为重症腺病毒肺炎组（33例）和普通腺病毒肺炎组（65例），于患儿入院1d内采集外周静脉血，检测其血清相关指标水平值，并比较2组相关指标的水平差异。结果发现，重症腺病毒肺炎组患儿年龄较普通腺病毒肺炎组更小（P<0.05），合并肺炎支原体感染率、血清炎症指标TNF-α、IFN-γ、IL-6、CRP、MIP-1α以及TGF-β1、VEGF水平值明显较普通腺病毒肺炎组更高（P<0.05），血清IgA水平值低于普通腺病毒肺炎组（P<0.05）；多因素Logistic回归分析确认年龄、肺炎支原体感染、高CRP、VEGF、IFN-γ、TGF-β1及低IgA为SAP危险因素。Pearson相关性分析显示，血清IgA水平表达与SAP呈负相关，CRP、VEGF与水平表达SAP均呈正相关；ROC曲线分析表明，联合检测对SAP的诊断效能高于各指标单独检测（P<0.05）。本研究结果表明，血清CRP、VEGF及IgA参与了儿童SAP的发生，联合检测能够进一步提高其诊断效能。
2021年4月我国江苏确诊全球第一例人感染H10N3禽流感病例，研究我国活禽市场H10N3亚型禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）的遗传多样性和分子特征，将为理解人感染H10N3病毒的进化来源、评估其溢出风险提供理论依据。为此，2021年6-12月我们对安徽地区活禽市场销售家禽及环境中H10N3 AIV进行实时荧光定量RT-PCR检测，共分离鉴定到6株H10N3病毒（AH01-AH06），其中1株为11月份环境样本分离株，其余5株为6月、11月和12月鸡咽拭子分离株。高通量测序和生物信息学分析表明，同一活禽市场分离到的毒株表现出一定的遗传多样性和重配模式差异：4株H10N3分离株（AH01-AH04）间核苷酸同源性均高于99.00%，而A/chicken/Anhui/11-30-YHZGS024-O/2021(AH05)株的MP基因片段和A/chicken/Anhui/06-26-YHZGS006-O/2021(AH06)株的PA、MP基因片段与其他分离株的核苷酸同源性较低，均低于97.04%。系统发育分析显示，本研究6株H10N3分离株与人源H10N3病毒的HA和NA基因均位于欧亚进化分支，它们的内部基因都来自H9N2亚型AIV。特别是分离株AH06与人感染H10N3病毒八个基因均位于同一进化分支，而分离株AH01-AH05的PA基因与人感染H3N8和H9N2毒株、MP基因与人感染H9N2毒株的亲缘关系较近。分子遗传特征分析显示，6株H10N3 AIV的血凝素蛋白均携带G228S等哺乳动物适应性突变，提高了对人源受体的结合能力。综上，本研究证实了禽源H10N3病毒在安徽省活禽市场的持续流行，揭示了禽源H10N3病毒的遗传多样性以及新型感染人的H10N3在我国家禽中传播，强调其携带多个哺乳动物适应性突变，为评估H10N3 AIV潜在公共卫生风险提供了理论依据。
<正>《病毒学报》是病毒学专业学术刊物，创刊于1985年，国际标准连续出版物号：ISSN 1000-8721，国内统一连续出版物号：CN 11-1865/R，国内邮发代号：82-227，国外发行代号：BM 6448。主管单位是中国科学技术协会，主办单位是中国微生物学会，承办单位是中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，出版单位是《病毒学报》编辑部。《病毒学报》是中国精品科技期刊、中国科技核心期刊、北京大学基础医学核心期刊《中文核心期刊要目总览》、武汉大学RCCSE（中国科学评价研究中心）中国核心学术期刊。刊载人与动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、噬菌体、类病毒、朊病毒以及新病毒等的基础理论研究和应用研究的新成果与新进展。
猪圆环病毒3型（Porcine circovirus 3,PCV3）是与猪皮炎和肾病综合征（Porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS）、生殖衰竭和多系统炎症等临床症状相关的病原体，对养猪业构成严重威胁。然而，一直以来，因PCV3分离较为困难等原因，其发病和致病机制目前仍不清楚。近年来，一些研究者成功地利用反向遗传操作系统拯救出PCV3，并初步揭示了其生物学特性。尽管如此，PCV3的致病机制仍未被完全阐明。本文综述了反向遗传技术在PCV3研究中的应用和进展，旨在为深入研究PCV3的致病机制、防控和疫苗研发等提供研究参考和新的思路。
新型冠状病毒（简称新冠病毒，Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）从发现到现在已流行4年，新冠病毒感染不但造成人类健康问题，也给公共卫生和医疗系统造成了严重负担，社会影响深刻。早期研发的新冠病毒疫苗非常有效，然而，随着新冠病毒在人群间不断流行，新冠病毒在不停地快速演变，在过去三年中，多种新冠病毒变种同时在全球范围传播交替流行。如今，新兴的新冠病毒奥密克戎（Omicron）谱系通过点突变和重组突变正在快速产生替代品，从而逃脱针对新冠病毒的中和抗体。刺突（Spike）蛋白作为主要诱导新冠病毒中和抗体的抗原，对其变异进化特征的绘制及生物学特性研究，不但有助于我们理解新冠病毒抗原是如何进化，也能为不同新冠病毒变异谱系是否发生免疫逃逸进行评估与预测。将重点关注新冠病毒刺突蛋白的进化变异及其改变后带来的生物学特性的改变。
无症状托幼儿童和低学龄儿童中致腹泻病毒感染情况研究较少，本研究抽取三个街镇460名4周之内未出现过急性胃肠炎症状的3～9岁儿童，采集粪便标本，使用实时荧光RT-PCR检测方法对五种致腹泻的病毒（诺如病毒、札如病毒、腺病毒、星状病毒、轮状病毒）进行筛查。无症状儿童中致腹泻病毒检出率为8.26%(38/460)，诺如病毒检出率最高为3.26%(15/460)，其次为腺病毒（2.61%,12/460），札如病毒（1.52%,7/460），星状病毒（0.43%,2/460），混合检出率为0.43%(2/460)，未检测到轮状病毒。不同性别、机构的检出率均无统计学（χ2=0.095,P=0.76；χ2=0.86,P=0.354）；人口密度中等的FT街道阳性率低于人口密集的FZ街道和人口密度低的乡镇地区WZ镇（χ2=9.55,P=0.002；χ2=6.80,P=0.009）；托幼机构和小学均表现出低年级阳性率较高的现象（托幼机构3～4岁组阳性率13.33%,5～6岁组阳性率2.44%；小学6～7岁组阳性率11.11%,8～9岁组未检出阳性）。不同性别、机构、街镇的诺如病毒检出率均无统计学差异。腺病毒和星状病毒仅在托幼儿童中检出。调查后一个月内所有调查对象涉及的班级均无急性胃肠炎疫情发生。