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人类病毒综述

基于蛋白质结构的疫苗理性设计

李子晨;李智华;王佑春;李倩倩;

随着人们对病毒抗原结构的深入认识,基于蛋白质结构的抗原设计已经成为新型疫苗研发的重要手段。本文总结了以结构生物学为基础的结构疫苗学近年来的发展进程及研究方向,重点介绍了基于氨基酸位点突变的结构疫苗学设计方法,包括二硫键取代、脯氨酸取代、空腔疏水取代等,并讨论这些方法在人类免疫缺陷病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、新冠病毒、流感病毒及人乳头瘤病毒等病毒疫苗研发中的具体应用。

2024 年 03 期 v.40 ; 昆明市国际(对外)科技合作基地(项目号:GHJD-2021016),题目:新型疫苗合作研究平台;; 云南省重大科技专项计划(项目号:202202AA 100014),题目:新型冠状病毒协同疫苗抗感染免疫及加强免疫机制研究及临床申报~~
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信息

中国学术期刊影响因子年报(自然科学与工程技术·2023版)

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2024 年 03 期 v.40 ;
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短篇论著

引起2017年兰州市一起疱疹性咽峡炎暴发疫情的CV-A2的基因特征分析

陈建华;于德山;武海卓;赵哲;赵晓虹;张勇;张晓曙;

为了解引起2017年10月甘肃省兰州市一起疱疹性咽峡炎(Herpangina,HA)暴发疫情的致病病原体及其病原学特征,对采集的患儿的37份咽拭子样本开展病毒分离培养,然后对分离到的毒株采取一代测序获取VP1区全长核苷酸序列,根据分子定型的方法进行肠道病毒型别鉴定。根据VP1区核苷酸差异选择3个毒株进行二代测序,获取全基因组序列。使用MEGA软件(版本号11.0)进行病毒的核苷酸,氨基酸相似性分析,VP1区的氨基酸突变位点分析,并构建系统发育树,使用Simplot(版本号3.5.1)软件进行病毒重组分析。本次疫情中分离到的毒株鉴定为柯萨奇病毒A2型(Coxsackievirus A 2, CV-A2),分子分型显示属于D基因型,且VP1区第102位氨基酸发生了丙氨酸到甘氨酸(A102G)的突变,与省内2014-2015年分离到的两株CV-A2毒株在该位置的突变不同。重组分析发现,病毒在P2区和P3区发生了以CV-A4为主的重组事件。本次疫情的致病病原体CV-A2存在着VP1区氨基酸A102G的特征性变异及P2区和P3区的重组,需要加强对肠道病毒的变异和重组的监测和研究,以提升预警能力。

2024 年 03 期 v.40 ; 甘肃省自然科学基金项目(No.20JR5RA142),题目:甘肃省疱疹性咽峡炎病原学监测研究;; 甘肃省卫生行业科研计划项目(No.GSWSKY2017-23),题目:外环境脊髓灰质炎病毒和其他肠道病毒病原学检测及分子流行病学特征性研究~~
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人类病毒综述

病毒性疾病基因修饰小鼠模型的研究进展

吴海婷;范胜涛;张才星;李牧遥;张艺薇;黄璋琼;

随着腺相关病毒、慢病毒载体转染及靶向核酸酶等基因修饰技术迅速发展,其被广泛应用于构建病毒性疾病基因修饰小鼠模型,这对于研究病毒的结构、功能及致病机制具有重要的价值。本文就近年来构建的基因修饰小鼠病毒感染模型进行梳理,讨论基因修饰技术在多种病毒性疾病小鼠模型中的研究进展,分析这些模型对在病毒性疾病的预防和治疗中的应用前景,以期为病毒性疾病相关的治疗药物和疫苗研究提供参考。

2024 年 03 期 v.40 ; 云南省科技厅科技计划项目(项目号:202105AD160018),题目:云南省技术创新人才培养对象;; 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(项目号:2021-I2M-1-043),题目:创新疫苗关键技术研究;; 国家自然科学基金联合基金项目(U2022214),题目:三七通过抑制CKLF1减少免疫血栓形成发挥脑中风治疗特色的物质基础与作用机制研究~~
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人类病毒研究论著

利用CRISPR/Cas9技术建立STAT1敲除细胞系及其功能验证

张俊梅;王芳;应旗康;冯文杰;古天乐;吴兴安;

信号转导和转录活化因子1(Signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)是干扰素信号通路中的关键分子,在对抗病毒和其他病原体的免疫反应中发挥重要作用,构建STAT1敲除细胞系有助于研究其在病毒感染过程中的作用与机制。本研究利用CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas9)基因编辑技术构建STAT1基因敲除细胞系。首先构建STAT1基因特异性打靶载体,后通过慢病毒转导人非小细胞肺癌细胞系(Human non-small cell lung cancer cells,A549),嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化,最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行敲除及敲除回补验证,成功构建一株STAT1基因敲除(STAT1 gene knockout,STAT1-KO)的A549细胞,且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力。以汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)感染验证,发现在该细胞系中病毒复制水平明显升高。本研究成功构建了一株STAT1-KO A549细胞,可为抗病毒药物和干扰素信号通路研究提供有力工具。

2024 年 03 期 v.40 ; 国家自然科学基金面上项目(项目号:81971563),题目:基于汉滩和汉城病毒包膜糖蛋白保守区域设计的肾综合征出血热通用亚单位疫苗的研究;国家自然科学基金面上项目(项目号:82272330),题目:NLRC3-mTORC1轴介导的T细胞代谢重编程在HFRS急性肾损伤中的作用与机制研究;; 青年科学基金(项目号:82302525),题目:GSK3β通过磷酸化降解NP抑制汉滩病毒感染的作用和机制研究~~
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人类病毒研究论著

表达gH/gL抗原的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠后的T细胞表位鉴定

石雪洋;郝彦哲;李晨雨;马琦;王冰丹;冯霞;李淑英;

为了鉴定表达爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)gH/gL保护性抗原的腺病毒载体疫苗在BALB/c小鼠中的T细胞表位,本研究使用表达gH/gL蛋白的腺病毒载体EBV疫苗免疫BALB/c小鼠,利用IEDB Analysis Resource软件对序列进行亲和力预测,设计合成EBV gH基因和gL基因的肽库,并将其混合成肽池,取免疫后的小鼠脾细胞进行IFN-γ ELISPOT检测,通过肽池和单肽两轮筛选检测具有阳性反应的多肽片段,确定优势反应肽。结果显示筛选出gH基因5条特异性优势肽,其中序列为LRGPFSYPSLTSAQS的单肽反应最强;gL基因4条特异性优势肽,其中序列为ASLNSPKNGSNQLVI的单肽反应最强。本研究使用IFN-γ ELISPOT法筛选和确定了9条EBV gH抗原特异性和gL抗原特异性优势T细胞表位,为EBV免疫学与疫苗研究提供了参考。

2024 年 03 期 v.40 ; 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(项目号:2018ZX10731101-002-010),题目:MVA及Ad5载体疫苗联合应用的临床前研究;; 河北省自然基金生物医药联合基金培育项目(项目号:H2022209049),题目:HPV E6E7融合基因重组病毒的构建及其抗肿瘤机制研究~~
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人类病毒综述

病毒逃逸cGAS-STING通路介导的抗病毒免疫机制研究进展

田娇;谢正德;

cGAS-STING信号通路是天然免疫的重要组成部分。病毒感染后,宿主启动cGAS-STING通路诱导干扰素和干扰素刺激基因的表达发挥抗病毒作用。然而,病毒为了存活和复制,也进化出多种策略抵御机体的抗病毒免疫反应。针对cGAS-STING这一信号通路,不同的病毒其作用的靶点不同;即使是同一种病毒,不同的病毒蛋白作用的机制也不尽相同。本文总结了常见DNA病毒和RNA病毒逃逸cGAS-STING通路介导的抗病毒免疫的方式和策略,为病毒感染的致病机制研究以及疫苗和药物的研发提供参考。

2024 年 03 期 v.40 ; 国家自然科学基金项目(项目号:82072266),题目:人腺病毒7型感染激活炎症小体的机制研究;; 中国医学科学院医学与健康科技创新工程(项目号:2019-I2M-5-026),题目:儿童危重感染诊断关键技术和免疫机制研究~~
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人类病毒综述

假病毒包装系统发展及新兴应用

葛慧敏;蒋雯玲;方中岳;李少伟;顾颖;

假病毒是一种人工制造的嵌合重组病毒颗粒。根据研究需要,可基于不同病毒载体包装系统,使病毒颗粒表面携带其它病毒的包膜蛋白/衣壳蛋白。重组假病毒颗粒具有与活病毒相似的结构及功能,可作为活病毒的替代品用于病毒学研究。本文综述了基于不同病毒载体包装系统的常用假病毒构建策略、影响假病毒构建/滴度的因素及假病毒的新兴应用,以期为高致病性、高传染性病毒的安全研究提供参考思路。

2024 年 03 期 v.40 ; 国家自然科学基金(项目号:82171821),题目:人免疫缺陷病毒新型免疫原的分子设计及其广谱中和免疫原性的研究~~
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人类病毒综述

中国乙脑病毒研究进展

殷启凯;王环宇;梁国栋;

20世纪40年代,中国科学家从病毒性脑炎患者标本首次分离到乙脑病毒,此后陆续从乙脑患者标本、多种蚊虫媒介标本和动物标本分离到大量乙脑病毒。本文系统介绍中国在乙脑病毒的地域分布、蚊虫传播媒介以及乙脑病毒分子遗传进化等方面的研究现状,以推动相关研究。

2024 年 03 期 v.40 ; 国家重点研发计划资助(项目号:2022YFC2305304),题目:急性自然疫源性传染病病原体基因组和关键甄别位点参比数据库的建立;国家重点研发计划资助(项目号:2022YFC2302700),题目:跨境虫媒传染病防控病原监控体系研究与口岸应用;; 国家自然科学基金重大项目(项目号:81290342),题目:蚊虫携带人类病原体的发现与分离鉴定,分布特点,遗传进化规律及其与人类病毒的关系~~
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痘病毒研究专题论著

检测痘苗病毒体外感染的病灶形成方法的优化与应用

楚巧鸿;冯霞;李佳;张菱芳;单徐畅;舒畅;程雪婷;霍恕婷;邓瑶;谭文杰;

本研究旨在建立一种快速、通用、高通量的病灶形成测定法(Focus-forming assay, FFA),用于痘苗病毒(Vaccinia virus, VACV)的研究。首先采用经典噬斑染色法与免疫噬斑法对不同VACV代表性毒株(Western Reserve strain, WR; Tiantan strain, VTT; Modified Ankara strain, MVA)在BHK-21细胞和Vero细胞上的噬斑特性进行评估,通过实验条件(包括显色液、非特异性染色、细胞培养板和病毒培养时间)的优化,提高病灶的可视化质量和测定的准确性。并基于改进优化的FFA法研究了VACV在BHK-21细胞和Vero细胞上的生长曲线,同时对FFA法的重复性进行了评估。研究发现BHK-21细胞对VACV的感染更加敏感,适宜于多种VACV滴度测定。实验条件的优化显著提高了病灶的可视化质量和测定的准确性。应用FFA法发现WR、VTT和MVA毒株在BHK-21细胞上能够有效复制,而MVA在Vero细胞上的复制受限,且FFA法在同一实验内具有良好的重复性,变异系数在0.17%到3.50%之间。改进后的FFA法是一种快速、通用、高通量的方法,适用于痘苗病毒滴度的测定,为痘苗病毒的研究和应用提供了可靠的技术支持。

2024 年 03 期 v.40 ; 国家重点研发计划(项目号:2023YFD1800405),题目:抗猴痘药物筛选与阻断技术研究;国家重点研发计划(项目号:2022YFC2303401),题目:潜在高危新病毒风险识别的新技术体系研究~~
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