为了调查宁夏地区蚊虫携带主要蚊媒病毒的种类及其流行情况，本研究于2023年在宁夏采集蚊虫样本，采用实时荧光定量逆转录PCR(Reverse transcription-quantitative real-time PCR, RT-qPCR)筛查6种蚊媒病毒核酸，包括塔希纳病毒（Tahyna virus, TAHV）、乙脑病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）、辛德毕斯病毒（Sindbis virus,SINV）、西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）、库蚊黄病毒（Culex flavivirus, CxFV）和盖塔病毒（Getah virus,GETV）。对阳性样本进行病毒基因扩增、序列测定及系统进化分析。结果共采集5540只蚊虫标本，包含伊蚊、按蚊和库蚊，其中伊蚊数量最多为3350只（60.47%）。按采集时间、地点和蚊种共分装为185批标本。RT-qPCR检测结果显示，1批蚊虫JEV阳性，1批蚊虫TAHV阳性，55批蚊虫CxFv阳性。经Sanger测序获得1株TAHV的S、M和L段基因序列，长度分别为767 nt、3836 nt、6814 nt。1株JEV全基因组序列，长度为10967 nt。36株CxFv E基因序列，长度约为1450 nt。同源性及系统发育分析结果显示，新测序的TAHV S、M、L段基因序列分别与内蒙古分离株HQ541823.1、盘锦分离株OP727995.1和捷克斯洛伐克分离株KF361881.1亲缘关系最近，核苷酸（氨基酸）相似性分别为99.29%(100%)、94.76%(98.47%)、95.22%(99.25%)；新测序的JEV全基因组序列与2020年四川毒株JEV-SC-2020-1亲缘关系较近，核苷酸（氨基酸）相似性为99.83%(99.97%)，同属于GIb型；2批CxFv(NX23176、NX23182)属于GIB型，34批CxFv属于GIA型。本研究于2023年在宁夏采集的蚊虫中检测到3种蚊媒病毒，并首次在宁夏获得1株TAHV S、M、L段完整编码区基因组序列，为当地蚊媒病毒监测和防控提供了重要的基础数据。
为对猪急性腹泻综合征冠状病毒（Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV）复制过程中基因组正负链RNA进行定量检测，以实现更好地了解SADS-CoV的复制和转录机制。本研究根据SADS-CoV N基因序列，通过生物学软件SnapGene和Primer Premier 6.0设计含有非病毒核苷酸标签序列的链特异性引物，建立了针对SADS-CoV N基因不同链RNA的链特异性实时荧光定量PCR(Strand-specific real-time fluorescence quantitative PCR,ssRT-qPCR)检测方法，并对其敏感性、重复性、特异性进行评估，同时对不同剂量SADS-CoV感染细胞后病毒复制过程中N基因的正负链RNA的拷贝数进行了定量检测。结果表明，以重组质粒标准品构建的标准曲线在10~2拷贝/μL～10~8拷贝/μL范围内具有良好的线性关系，对正负链的检测下限为10拷贝/μL，能够特异性的区分病毒复制过程中产生的正负链，具有较高的特异性、灵敏性和重复性。SADS-CoV感染IPI-2I细胞后，其病毒正负链含量水平呈现持续增加。以MOI=1感染细胞48h后，其病毒正负链拷贝数可分别达到1.8×10~8拷贝/μL和5.6×10~4拷贝/μL。本研究成功建立了SADS-CoV N基因链特异性SYBR Green实时荧光定量检测法，可区分和定量SADS-CoV在复制过程中产生的不同链RNA，为后续病毒的复制转录调控机理和相关抗病毒机制的研究提供了有效检测手段。
痘苗病毒C3L编码的补体控制蛋白（Vaccinia virus complement control protein,VCP）具有抑制补体系统激活等生物学功能，但其对病毒复制扩散及致病性的影响及具体机制尚不明确。本研究利用CRISPR/Cas9技术将痘苗病毒天坛株（Vaccinia virus Tiantan strain,VTT）C3L缺失构建了重组病毒rVTT-mCherryΔC3L，并通过细胞和小鼠模型系统评估其生物学特性。结果显示：在HeLa、Vero和BHK-21细胞中，rVTT-mCherryΔC3L(MOI=0.01)的复制效率与VTT无显著差异，但感染48h后形成的免疫噬斑面积显著增大（分别为VTT的1.3倍、2.1倍和1.6倍，P <0.01）；滴鼻感染BALB/c小鼠后，5×10~4 PFU rVTT-mCherryΔC3L感染的小鼠，体重下降幅度减轻且恢复时间提前，5×10~5 PFU感染时存活率显著高于VTT组（100%vs 16.7%）。研究结果表明，C3L缺失虽未显著影响病毒复制能力，但细胞间扩散能力增强，而小鼠体内毒力降低。该研究为痘苗病毒减毒疫苗设计及抗正痘病毒策略提供了重要理论依据。
麻疹是一种由麻疹病毒引起的急性高传染性疾病，对儿童群体构成严重威胁。1949年至1967年，在疫苗及冷链技术尚未普及、医疗资源极度匮乏的背景下，山东省曾多次遭遇麻疹流行高峰，公共卫生体系面临严峻挑战。本文系统回顾了该时期山东地区在卫生宣传与社会动员、易感人群隔离与保护、成人血清注射与中西医结合治疗，以及基层卫生网络建设与资源分配等方面的防控实践。研究表明，这些措施在降低病死率、遏制疫情扩散以及完善疫情监测、优化社会动员机制和提升基层医疗资源调配能力等方面发挥了积极作用。本文总结了山东麻疹防控的历史经验，为现代公共卫生治理提供了宝贵借鉴，尤其在资源有限条件下的综合防控策略与社会动员模式方面具有重要启示。
本研究旨在明确HCoV-229E在多种细胞中的感染特征与复制动力学。首先比较了33℃和37℃下HCoV-229E在MRC-5中的致细胞病变效应、核酸增殖与感染活性等特征，确定病毒培养温度；通过RT-PCR(Real-time reverse transcription,rRT-PCR）比较了HCo -229E在不同种属与组织来源的13种细胞系（Huh7.5、He La、MRC-5、A549、RD、Hep-2、Calu3、Ha Cat-WT、Vero、LLC-MK2、MDCK、BHK-21、Mv1Lu）中的病毒RNA复制水平，评估了上述细胞对病毒的易感性；进一步探究其在易感细胞系中的致细胞病变效应（Cytopathic effect,CPE）、半数组织感染剂量（50%of tissue culture infectious dose,TCID_(50)）复制动力学和噬斑形成特性。研究发现，HCoV-229E以同等MOI感染MRC-5后，病毒RNA与TCID_(50)的复制增殖均表现为33℃优于37℃。病毒RNA复制动力学结果显示，13种细胞中的6种人源细胞（Huh7.5、HeLa、MRC-5、RD、A549、Hep-2）对HCo V-229E易感，但在Hep-2中的复制较差。CPE结果表明，Huh7.5与He La均在感染后48h观察到CPE，并于72h出现细胞变圆脱落，与MRC-5趋势一致；而A549和RD分别于72h和96h观察到CPE，但细胞脱落死亡情况较轻。病毒活性复制动力学显示，0.01与0.001MOI感染剂量下，HCo V-229E在Huh7.5中分别于24h和48h达到复制高峰（10~(6.96) TCID_(50)/m L和10~(6.65) TCID_(50)/mL,P<0.05）；在HeLa中分别于48h与72h达到复制高峰（10~(6.8) TCID_(50)/mL和10~(6.56) TCID_(50)/mL,P<0.05）；在A549中均在96h到达复制高峰（约10~(6.3) TCID_(50)/mL,P>0.05）；在RD细胞中均在72h到达复制高峰（10~(6.58) TCID_(50)/m L和10~(6.65) TCID_(50)/mL,P>0.05）。HCoV-229E可在Huh7.5、HeLa、A549、RD细胞中产生不同形态的空斑，其中He La细胞时间短（96h）、噬斑清晰易于计数，是HCoV-229E空斑实验的良好选择。本研究通过RT-PCR、CPE、病毒活性和噬斑特性系统展示了HCoV-229E在13种细胞中表现出不同感染特征与复制动力学，为深入研究HCoV-229E病原生物学和抗病毒药物筛选等提供了参考。
为了建立一种能够检测猫泛白细胞减少症病毒（Feline panleukopenia virus, FPV）的双抗体夹心酶联检测（ELISA）方法，本研究首先构建了FPV VP2蛋白的原核表达载体并进行了VP2蛋白的原核表达。经SDS-PAGE实验验证及反应原性检测后，以VP2重组蛋白作为免疫原，通过间接ELISA方法筛选出2株能特异性识别VP2蛋白的高亲和力单克隆抗体，分别命名为2F10和3D2。通过对捕获抗体包被浓度、酶标检测抗体使用浓度等最适反应条件进行摸索，建立了FPV的双抗体夹心ELISA检测方法，并对方法的敏感性、特异性及与PCR方法的符合率进行验证。结果显示该方法的最低检测限为10~(3.2) TCID_50/mL，高于市售商品化试纸条，且与猫杯状病毒（Feline calici virus,FCV）和猫疱疹病毒1型（Feline herpesvirus type 1, FHV-Ι）均无交叉反应，特异性较好，与FPV标准检测方法 PCR的符合率为98.9%，且操作简便、检测快速，为FPV的检测提供了一种有效的工具，为进一步开发FPV检测试剂盒奠定了基础。
我国乙肝病毒携带者人数约7500万，乙肝病毒感染是引起终末期肝病的主要原因，是我国卫生健康方面主要负担之一。实现慢乙肝功能性治愈可有效避免相关肝病发生，延长患者的生存期，目前已成为乙肝领域研究热点。相当比例慢乙肝优势人群经干扰素治疗后可实现安全停药，然而，停药判断缺少简便、可靠、易操作的生物标志物。随着乙肝新药或新药联合治疗方案不断出现，越来越多患者有望实现功能性治愈，迫切需要解决慢乙肝功能性治愈的可靠生物标志物的问题。本文综述了基于乙型肝炎病毒本身的病毒学标志物（如乙肝两对半、HBV DNA/RNA、HBcrAg、HBV cccDNA），以及宿主相关免疫学生物标志物（如乙肝病毒特异性抗体、免疫细胞等）的发展历程与各评价指标的特色，并针对目前存在的问题，提出我们的观点与展望。
间充质细胞又称为间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSC）、间质干细胞、间叶干细胞，泛指一类具有一定分化潜能、可以分化成多种细胞类型、具有组织修复功能的多能基质细胞群。骨髓间充质细胞分化为成骨细胞是骨形成的关键步骤。然而成骨分化早期阶段所涉及的机制尚不清楚。前期研究发现FHL2是LIM蛋白超家族中LIM-only亚类的成员，在小鼠和人类MSCs中地塞米松诱导的早期成骨细胞分化过程中该亚类显著上调。此外，FHL2可促进成骨细胞转录因子Runx2、碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）、I型胶原蛋白A1 (Collagen type I alpha 1 chain,COL1A1)的表达以及间充质细胞的细胞外基质矿化（Extracellular matrix mineralization）。本研究使用sh-RNA敲除FHL2观察MSCs中重组腺相关病毒（Recombination adeno-associated virus, rAAV）诱导的成骨细胞标志基因表达情况。结果发现FHL2与β-catenin相互作用，后者是Wnt信号诱导的骨形成中的关键参与者。FHL2-β-catenin相互作用增强了β-catenin核转位和TCF/LEF转录，导致Runx2和ALP表达增加，而Wnt抑制剂DKK1可抑制这种表达。这些结果表明，FHL2是间充质细胞分化成成骨细胞的内源性激活剂，它通过激活Wnt/β-catenin信号依赖性Runx2的表达，介导重组腺相关病毒诱导的间充质干细胞成骨分化。
<正>《病毒学报》是病毒学专业学术刊物，创刊于1985年，国际标准连续出版物号：ISSN 1000-8721，国内统一连续出版物号：CN 11-1865/R，国内邮发代号：82-227，国外发行代号：BM 6448。主管单位是中国科学技术协会，主办单位是中国微生物学会，承办单位是中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，出版单位是《病毒学报》编辑部。《病毒学报》是中国精品科技期刊、中国科技核心期刊、北京大学基础医学核心期刊《中文核心期刊要目总览》、武汉大学RCCSE（中国科学评价研究中心）中国核心学术期刊。刊载人与动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、噬菌体、类病毒、朊病毒以及新病毒等的基础理论研究和应用研究的新成果与新进展。栏目有论著、研究快报（短篇论著）、评述、综述以及简讯等。