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2025 02 v.41 541-549
猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心酶联检测方法的建立
基金项目(Foundation): 2024年北京市博士后科研活动经费(京人社专技字[2024]68号),题目:猫泛白细胞减少症病毒胶体金抗原检测试纸条的研制~~
邮箱(Email): zhanglei@cahic.com;wzl9698@zju.edu.cn;
DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.240235
中文作者单位:

浙江大学,动物科学学院;中牧实业股份有限公司,农业部兽用生物制品与化药重点实验室,北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心;浙江大学,动物医学中心;

摘要(Abstract):

为了建立一种能够检测猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)的双抗体夹心酶联检测(ELISA)方法,本研究首先构建了FPV VP2蛋白的原核表达载体并进行了VP2蛋白的原核表达。经SDS-PAGE实验验证及反应原性检测后,以VP2重组蛋白作为免疫原,通过间接ELISA方法筛选出2株能特异性识别VP2蛋白的高亲和力单克隆抗体,分别命名为2F10和3D2。通过对捕获抗体包被浓度、酶标检测抗体使用浓度等最适反应条件进行摸索,建立了FPV的双抗体夹心ELISA检测方法,并对方法的敏感性、特异性及与PCR方法的符合率进行验证。结果显示该方法的最低检测限为103.2 TCID_50/mL,高于市售商品化试纸条,且与猫杯状病毒(Feline calici virus,FCV)和猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus type 1, FHV-Ι)均无交叉反应,特异性较好,与FPV标准检测方法 PCR的符合率为98.9%,且操作简便、检测快速,为FPV的检测提供了一种有效的工具,为进一步开发FPV检测试剂盒奠定了基础。

关键词(KeyWords): 猫泛白细胞减少症病毒;VP2蛋白;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA
参考文献

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基本信息:

DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.240235

中图分类号:S852.65

引用信息:

[1]杨贝妮,张漫,董春娜等.猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心酶联检测方法的建立[J].病毒学报,2025,41(02):541-549.DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.240235.

基金信息:

2024年北京市博士后科研活动经费(京人社专技字[2024]68号),题目:猫泛白细胞减少症病毒胶体金抗原检测试纸条的研制~~

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